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刘芳典23

新虫 (初入文坛)

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[求助] 换了不同产家的HPLC色谱纯的甲醇，做梯度洗脱的时候基线不一样已有1人参与

换了不同产家的HPLC色谱纯的甲醇，做梯度洗脱的时候基线不一样。以前的是0.22滤膜过滤的甲醇，现在的产家是0.45滤膜过滤。换了新的之后更换浓度配比之后，出现了比较尖锐的峰，以前是比较圆滑的峰。

@wyy080214 @学术巨星 @klicking 发自小木虫Android客户端

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1楼 2017-03-30 10:42:59

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HFMH

至尊木虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

这种情况很正常，梯度洗脱随着有机相的增大，会将流动相中有机杂质洗脱出来产生空白峰；如果水相不是用超纯水（包括缓冲盐不是用色谱纯），有机相不是用进口的，则系统空白峰会很多、很大、很杂，影响样品分析结果。特别紫外检测波长较低时（如190-210nm左右），空白峰干扰很明显，且基线漂移也很大。因此，建议流动相尽可能使用超纯水（如Millipore），有机相用进口的，试剂用色谱纯或高纯，这些对梯度分析较好，更会延长色谱柱的使用寿命。

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