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pei450295791

新虫 (初入文坛)

[求助] 我们大肠杆菌从去年开始发酵就菌体自溶 已有2人参与

我们大肠杆菌从去年开始发酵10L转200L,转后OD长不到10就自溶了,菌体自溶,一直怀疑是噬菌体感染,可是昨天发酵300LOD29半小时就4了,我不是本专业的,做菌种,很头疼,求大神指教!!?

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pei450295791

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by pei450295791 at 2017-03-29 12:05:51
我们大肠杆菌从去年开始发酵10L转200L,转后OD长不到10就自溶了,菌体自溶,一直怀疑是噬菌体感染,可是昨天发酵300LOD29半小时就4了,我不是本专业的,做菌种,很头疼,求大神指教!!?
...

追加提问,一直怀疑原始种子携带噬菌体,同时摇瓶过夜未诱导(IPTG)未出现菌液清了的问题,同时也怀疑过操作过程中携带进来噬菌体,不过为什么没诱导的没问题,一诱导就出现问题!!!求赐教!

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2楼2017-03-29 12:09:59
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绝对零度的笑

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
发酵产物有毒?可能你的诱导蛋白有毒吧,把菌给毒死了
3楼2017-03-30 23:24:25
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wl6166

银虫 (小有名气)

可能是你的诱导浓度太高,可以尝试换一下其它的诱导剂吗?

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4楼2017-03-31 00:04:12
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a785182574

新虫 (初入文坛)

你们在实验室时候培养有没有自溶?我这边实验室5L罐培养没问题,但是到300L罐时候,培养两个小时,OD大概80%就开始自溶了,我也想知道出了什么问题

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5楼2017-04-23 18:49:44
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caoqingqing

新虫 (初入文坛)

我也为这样的现象烦恼,求解!
6楼2017-06-07 10:57:37
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wht007

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by caoqingqing at 2017-06-07 10:57:37
我也为这样的现象烦恼,求解!

同病相怜的这么多,有解决了的吗?求支招啊~~~
努力努力再努力。
7楼2018-03-13 19:23:15
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阿里郎爱阿里

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.不太可能是蛋白或诱导剂的问题。
2.噬菌体污染的可能性很大,灭菌后饥饿一周看看。
祝顺利!
8楼2018-03-15 14:25:14
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15881470571

新虫 (正式写手)

这样的问题是周期性的,难道是宿主菌的问题?据说BL21(DE3菌株有这样的问题)

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9楼2018-08-18 10:41:16
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