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sywailuhan

铁虫 (初入文坛)

[求助] 鉴定一个基因的功能,用基因敲除和基因沉默,这两种方法有什么不... 已有2人参与

鉴定一个基因的功能,用基因敲除和基因沉默,这两种方法有什么不同,为什么有时候文献中两种方法都会用到? @gyesang

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Explor

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

基因敲除(knockout)是不改变DNA系列前提下,用含有一定已知序列的DNA片段与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重组,整合至受体细胞基因组中并得到表达的一种外源DNA导入技术。RFect转染试剂细胞转染性能优越,阳性率高达90%以上,基因敲除效果明显,对细胞毒性极低。
基因沉默(gene silencing)是由于各种原因,在不损伤原有DNA的情况下,使基因不表达或低表达的现象,基因沉默发生在两种水平上,一种是由于DNA甲基化、异染色质化以及位置效应等引起的转录水平的基因沉默,另一种是转录后基因沉默,即在基因转录后的水平上通过对靶标RNA进行特异性抑制而使基因失活,包括反义RNA、共抑制、基因压抑、RNA干扰(RNAi)和微小RNA(miRNA)介导的翻译抑制等。
个性化基因研究、科研试剂、诊断试剂和实验服务
3楼2019-12-20 11:47:54
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pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
基因敲除是在基因组水平,把目的基因给彻底敲掉,一般是移码突变;沉默一般是在转录水平,用shrna或者sirna跟目的基因转录后的rna结合,使其失去功能,有瞬时(转染shrna质粒或者sirna)或者伪稳转(慢病毒),这两个是大概的,还有很多细分的,要自己查资料了
2楼2017-03-28 13:48:49
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