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宇文诗畅

银虫 (小有名气)

[求助] 请教各位关于优化酶标记抗体实验步骤问题

请问各位 在下按照过碘酸钠法标记的羊抗人IgM血清IgG,做elisa实验结果却没什么活性,现在想优化下实验步骤,有哪位高人能指点一下吗?顺便问一下酶标记抗体过程中所加试剂和不同的PH环境分别都有什么作用吗?感激不尽!
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xuqin.6001

木虫 (初入文坛)

高碘酸钠是将HRP表面的糖分子羟基氧化成醛基与Ig上面的氨基结合;乙二醇促进酶与抗体的结合;碳酸盐缓冲液pH9.5,利于醛化过程;硼氢化钠将酶与抗体结合物还原成稳定复合物;饱和硫酸铵溶液将酶与抗体结合物盐析出来;磷酸缓冲液pH7.4,保护酶标抗体活性。
2楼2017-03-30 11:18:06
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