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[交流] 液相色谱测定胰岛素，没有出现主峰，不知道怎么回事

液相色谱测定胰岛素，使用的柱子是ZORBAXEclipsePlusC18 ，流动相为：A相：0.025mol/L无水硫酸钠，0.025mol/L磷酸二氢钠，B相：乙腈， A:B=72:28 ，柱温40℃，流速1.0ml/min, 波长214nm,做出来的图是这样的，没有出现主峰，不知道怎么回事，请各位大神帮忙分析一下什么原因？谢谢

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1楼 2017-03-27 09:41:12

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之前有在同一条件下测出图吗？
如果之前测出过：
1.样品配置有没有问题，分解？含量低？
2.仪器进样有异常么？
还有你的图好像没传上来吧

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2楼2017-03-27 17:34:47

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 求道于申 at 2017-03-27 17:34:47
之前有在同一条件下测出图吗？
如果之前测出过：
1.样品配置有没有问题，分解？含量低？
2.仪器进样有异常么？
还有你的图好像没传上来吧

之前没有在同一条件下测过，这是参考文献的条件，只是把硫酸钠的浓度降低了，因为怕盐浓度高会堵塞系统。

IMG_20170326_175006.jpg

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3楼2017-03-28 16:16:23

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引用回帖:

3楼: Originally posted by fk快乐无限 at 2017-03-28 16:16:23
C:\Users\Administrator\Desktop 之前没有在同一条件下测过，这是参考文献的条件，只是把硫酸钠的浓度降低了，因为怕盐浓度高会堵塞系统。

IMG_20170326_175006.jpg
...

1.仪器做其他样品都能正常出峰吗，若是则下一步排查，不是检修仪器进样单元，检测器单元；

2.样品有没有问题，浓度太小低于检测限，增大进样量；

3.色谱柱选的是否合理，胰岛素属于生物品，这个和我们分析一般化学物质还是有特殊要求的，比如说管线，色谱柱都异于普通样品。
看到文献上有用280nm测的，可以试试。
希望早日解决问题，反馈学习学习