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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 液相色谱测定胰岛素，没有出现主峰，不知道怎么回事
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fk快乐无限

金虫 (小有名气)

[交流] 液相色谱测定胰岛素，没有出现主峰，不知道怎么回事

液相色谱测定胰岛素，使用的柱子是ZORBAXEclipsePlusC18 ，流动相为：A相：0.025mol/L无水硫酸钠，0.025mol/L磷酸二氢钠，B相：乙腈， A:B=72:28 ，柱温40℃， 流速1.0ml/min, 波长214nm,做出来的图是这样的，没有出现主峰，不知道怎么回事，请各位大神帮忙分析一下什么原因？谢谢
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1楼 2017-03-27 09:41:12
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求道于申

铜虫 (小有名气)
★
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之前有在同一条件下测出图吗？
如果之前测出过：
1.样品配置有没有问题，分解？含量低？
2.仪器进样有异常么？
还有你的图好像没传上来吧
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fk快乐无限
2楼2017-03-27 17:34:47
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fk快乐无限

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 求道于申 at 2017-03-27 17:34:47
之前有在同一条件下测出图吗？
如果之前测出过：
1.样品配置有没有问题，分解？含量低？
2.仪器进样有异常么？
还有你的图好像没传上来吧

之前没有在同一条件下测过，这是参考文献的条件，只是把硫酸钠的浓度降低了，因为怕盐浓度高会堵塞系统。
液相色谱测定胰岛素，没有出现主峰，不知道怎么回事
IMG_20170326_175006.jpg
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3楼2017-03-28 16:16:23
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求道于申

铜虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
3楼: Originally posted by fk快乐无限 at 2017-03-28 16:16:23
C:\Users\Administrator\Desktop 之前没有在同一条件下测过，这是参考文献的条件，只是把硫酸钠的浓度降低了，因为怕盐浓度高会堵塞系统。

IMG_20170326_175006.jpg
...

1.仪器做其他样品都能正常出峰吗，若是则下一步排查，不是检修仪器进样单元，检测器单元；

2.样品有没有问题，浓度太小低于检测限，增大进样量；

3.色谱柱选的是否合理，胰岛素属于生物品，这个和我们分析一般化学物质还是有特殊要求的，比如说管线，色谱柱都异于普通样品。
看到文献上有用280nm测的，可以试试。
希望早日解决问题，反馈学习学习
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4楼2017-03-29 10:58:31
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cao392090417

金虫 (小有名气)
★
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梯度条件是什么？
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5楼2017-03-30 10:44:31
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猴baobao


发自小木虫Android客户端
6楼2017-03-30 11:03:14
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w9412

新虫 (正式写手)
★
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我天天检测胰岛素，也是用此款仪器，中国药典有方法为什么不按照药典的方法？？？
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液相，分析纯化，多肽蛋白
7楼2017-03-30 13:08:01
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jxhdxmc

新虫 (初入文坛)
★
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先自己用紫外测一下最大吸收波长呢？
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8楼2018-08-04 10:50:49
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