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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » 基因敲除后还有蛋白条带
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crashandburn

银虫 (正式写手)

[求助] 基因敲除后还有蛋白条带 已有3人参与

为什么我的一个基因敲除了以后，还有正常大小的蛋白条带，只是表达量比较弱，没有野生型和突变株回补的那么多。请问各位知道原因吗，或者有没有相关的文献支持？ 敲除的是细菌的鞭毛蛋白编码基因。
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Stay hungry, stay foolish.
1楼 2017-03-24 10:43:19
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

半天云

新虫 (初入文坛)
可能是多拷贝，基因敲除要多几个方法去验证
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6楼2017-03-26 18:41:06
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bigbei

新虫 (初入文坛)
你确定这个基因只有一个copy吗，要是copy多的话，很可能敲不干净

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5楼2017-03-25 09:27:18
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crashandburn

银虫 (正式写手)
有可能是回复突变吗？ 回复突变发生的条件是怎么样的？
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Stay hungry, stay foolish.
2楼2017-03-24 10:57:49
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迷路人啊

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你跑胶是直接跑的全部蛋白吗？
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3楼2017-03-24 12:32:55
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普通回帖

crashandburn

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 迷路人啊 at 2017-03-24 12:32:55
你跑胶是直接跑的全部蛋白吗？

你好，跑的是全蛋白。野生株和突变株回补，条带都正常，但是突变株有一条淡淡的条带。
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4楼2017-03-24 15:16:24
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Xiaowe

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 半天云 at 2017-03-26 18:41:06
可能是多拷贝，基因敲除要多几个方法去验证

一般都用什么方法验证呢

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7楼2017-03-26 21:19:40
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leonscu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-27 07:41:34
引用回帖:
7楼: Originally posted by Xiaowe at 2017-03-26 21:19:40
一般都用什么方法验证呢
...

你可以查下这个细菌基因组上NCBI记载的编码这个蛋白的基因，会不会有可能是一个基因家族在编码，或者是几个基因协同表达，你敲得只是其中主要的一个基因，剩余的基因也能表达？
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lessismore.
8楼2017-05-09 13:37:36
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鱼的追求

铁虫 (初入文坛)
你好，我也是做细菌缺失的，现在想做回补株，试了几种质粒，都失败了，请问你是用的什么质粒做的呢/、？
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9楼2017-05-26 21:08:53
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zhl875891551

铁虫 (正式写手)
会不会是其他基因产生的类似蛋白

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心有多大，舞台就有多大！
10楼2017-09-22 12:27:32
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