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walking dead

金虫 (小有名气)

填料制备和蛋白纯化专家


【答案】应助回帖

“q柱流穿里有,但是量少”啥意思?Q柱子到底挂没挂柱?首先你目标蛋白等电点是4.7,这个时候就不要用SP了,无意义。pH大于pI,带负电荷用SP肯定不挂柱。建议你可以再用DEAE试试。试剂配置准确,样品溶解在平衡液里,保持缓冲液的电导蛋白溶液电导一致。上样前充分平衡,上样流速放慢,讲道理是不会不挂柱的。你的表达蛋白有his标签用Ni柱的话,也要注意你的缓冲液,咪唑浓度和pH。祝你顺利。
11楼2017-08-03 16:14:16
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

镍柱缓冲液体系中加4-8M的尿素试试,Q柱层析时,减慢上样流速。减少上样量。
12楼2017-08-08 10:58:57
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