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dreamer梦

铁虫 (小有名气)

[求助] HPLC 选择了双波长检测，计算时该如何？ 已有2人参与

HPLC 选择了双波长检测，计算时该如何？
测定单体酚，选择了15种标品，280和320nm检测，有的物质在两个波长下都有峰，一大一小，计算时荧光把两个峰面积加起来还是只算大的？
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Better me, on the way
1楼 2017-03-22 16:55:47
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
计算（或建立）含量都只在一个检测波长上考虑。采用两个波长（或更多波长）只为了在一次检测过程中检测多个样品而这些样品不能在同一个波长下检测。
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2楼2017-03-25 10:29:11
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烟雨落

新虫 (初入文坛)
可以请问下你测定单体酚的色谱条件是什么吗，我用乙婧和水，乙酸测定，用梯度除了第一次跑出来峰过之后再也没有跑出来过，

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3楼2018-06-08 17:01:14
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wbzdooxx

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

选280nm下供试品的峰面积与你的标准品峰面积去计算。
不同波长下峰面积不可累加！
BTW，为什么有15个标准品，测15种单体含量么？还是加起来当做总酚酸部位？
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4楼2018-06-10 01:28:34
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dreamer梦

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 烟雨落 at 2018-06-08 17:01:14
可以请问下你测定单体酚的色谱条件是什么吗，我用乙婧和水，乙酸测定，用梯度除了第一次跑出来峰过之后再也没有跑出来过，

二元梯度洗脱：流动相为 A 乙腈-冰乙酸（98:2, v/v），流动相 B 为水-冰乙酸（98:2, v/v）。洗脱程序：0~60 min, 5%~15% A; 60~65 min, 15% A; 65~66 min,
15%~20% A; 66~73 min, 20% A; 73~74 min, 20%~30% A; 74~80 min, 30% A; 80~81 min, 30%~40% A; 81~93 min, 40% A; 93~100 min, 40%~5% A。
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Better me, on the way
5楼2018-06-27 10:13:17
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