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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲
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共轭二烯烃

新虫 (初入文坛)

[求助] Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲 已有3人参与

15的分离胶，按照配方来配的，除了30%的acrbis.10%的SDS是自己配的，其他都是公用的。别人配12%的胶做出来是正常的。蛋白-80度放了两个星期拿出来跑的。看了好多人说，玻璃板受热不均导致胶凝的快慢不同，但是我吹干冷却好久之后才灌胶的。分离胶放了40分钟左右加浓缩胶放置20分钟。去离子水浸泡过夜。marker 上面都跑不开。。不知道问题出在哪里，有没有大神可以解答一下？

Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲


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1楼 2017-03-21 16:46:15
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共轭二烯烃

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-03-22 11:27:11
用水泡这么久胶的pH出现变化

有可能的ph计测出来去离子水只有5点多，我下次试试看做好直接用

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9楼2017-03-22 11:57:13
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共轭二烯烃

新虫 (初入文坛)
胶的图片
Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲-1


Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲-2


Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲-3



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2楼2017-03-21 16:47:20
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共轭二烯烃

新虫 (初入文坛)
Western blot 胶按照配方来但是跑完会卷曲-4

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3楼2017-03-21 16:47:47
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寥落星晨

木虫 (正式写手)
你的电流、电压的条件是多少

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4楼2017-03-21 19:32:49
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共轭二烯烃

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 寥落星晨 at 2017-03-21 19:32:49
你的电流、电压的条件是多少

电压先70伏半小时，后转110伏。

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5楼2017-03-21 21:27:22
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stevenshi021

新虫 (小有名气)
热了胶，可以稍微跑慢一点或者加点冰浴跑

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6楼2017-03-22 09:23:19
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前进中

金虫 (小有名气)
ph合适不？

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7楼2017-03-22 10:57:54
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用水泡这么久胶的pH出现变化
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8楼2017-03-22 11:27:11
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共轭二烯烃

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 前进中 at 2017-03-22 10:57:54
ph合适不？

Tris  hcl的ph是对的

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10楼2017-03-22 11:57:54
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