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Ashley玮

新虫 (初入文坛)

[求助] 细菌的划线培养与最后的鉴定 已有4人参与

第一次学做实验,之前送公司测序的PCR未纯化不知道为什么在学校跑出来有带但是送过去就没带了,还有一些测出来有高级结构和结合问题,杂交等情况,不知道为什么会这样,细菌划线培养的具体操作,如何找单菌落,PCR与最后鉴定的全过程不知道哪里出了问题,求帮助,谢谢

细菌的划线培养与最后的鉴定


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well_想太多

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Ashley玮: 金币+5, ★★★很有帮助 2017-03-25 20:56:34
培养时间长短根据你的菌的特性而定,不过一般细菌过夜培养18-24h足够了。从斜面挑菌1-2环足够 ,若是从菌液挑菌只要接种环在菌液中晃一圈就可以,然后在平板划线第一区划得是比较密的,目的是保证在平板上生长,然后烧接种环,冷却,再从第一区的划线部位开始连接画第二区,都是“之”字形,这时花的线就不那么密了。同理,再画第三区。一般第三区就会出现单菌落了,这三个区域的比例是3>2>1的。希望对你有帮助
16楼2017-03-23 10:29:06
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畏畏缩缩

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by wendy_2002 at 2017-03-22 13:13:07
三线是没错,问题是要每条线化之前都要烧接种针的

,我觉得你没有烧接种环

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18楼2017-03-23 20:59:56
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
菌体浓度太大了,记得烧涂布棒
···
5楼2017-03-22 08:37:20
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wendy_2002

新虫 (小有名气)

三线是没错,问题是要每条线化之前都要烧接种针的

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7楼2017-03-22 13:13:07
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wendy_2002

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wendy_2002 at 2017-03-22 13:13:07
三线是没错,问题是要每条线化之前都要烧接种针的

另外,第二条和第三条线不要沾菌液,直接从第一条划出的线上划一下就好。

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9楼2017-03-22 14:11:38
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Ashley玮

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhangbest007 at 2017-03-22 00:25:28
画线粘取的时候,轻轻沾一点就好了,不要戳一大块菌,连续划线,可以多划几组线,务必要有单菌落长出来,培养时间不能太长,否则单菌落又长到一起去了

单菌落是单独长出来的圆球形状的吗?长出单菌落之后还要继续蘸取划线培养吗?

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10楼2017-03-22 21:39:26
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普通回帖

小马哥636

新虫 (小有名气)

2楼2017-03-21 16:41:04
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不懂事的我

新虫 (正式写手)

你这样划线能找到单菌落么?太密了

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3楼2017-03-21 23:52:41
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zhangbest007

木虫 (正式写手)

画线粘取的时候,轻轻沾一点就好了,不要戳一大块菌,连续划线,可以多划几组线,务必要有单菌落长出来,培养时间不能太长,否则单菌落又长到一起去了

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学无止境
4楼2017-03-22 00:25:28
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sunnyue

新虫 (初入文坛)

你若初做,建议用稀释涂布的方法

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6楼2017-03-22 09:35:34
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hbtmsw

木虫 (小有名气)

先找一本微生物学实验手册之类的书学习一下划线技术,有几种方法,选个自己喜欢的多操作几遍就好了
8楼2017-03-22 13:40:59
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