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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请问有用Thermo Scientific Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix的虫友吗
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hxxzhz

铜虫 (小有名气)

[求助] 请问有用Thermo Scientific Phusion Flash High-Fidelity PCR Master Mix的虫友吗 已有1人参与

这个酶怎么样呢？我看网上有人说好用，但是我试过两次了，一次都没有扩出来。
它的延伸是15s-30s/kb吗？我怀疑是不是没有这么快啊？
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努力做一件事情。。。
1楼 2017-03-21 11:45:19
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冰之雪域

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-22 07:51:48
这酶挺好的，扩增速度确实快。你如果担心是扩增速度的原因，可以延长扩增时间，不知楼主的片段有多大，是否为高GC片段，模板是什么？

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4楼2017-03-21 12:22:55
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zcliang2014

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-03-22 07:52:09
多年来经验，这个酶是高保真酶，速度确实快，但是——对模版的要求比较高。模板脏的化，不建议用这个。
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7楼2017-03-21 21:17:06
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stevenshi021

新虫 (小有名气)
差不多，是普通的pfu加了一个DNA结合区域。复杂的基因可以放慢到30s每kb

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8楼2017-03-22 09:29:02
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普通回帖

xhmaohan


发自小木虫Android客户端
2楼2017-03-21 11:57:27
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石螺海玄


发自小木虫Android客户端
3楼2017-03-21 12:10:15
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Ivancao0908

禁言 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
5楼2017-03-21 13:28:32
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hxxzhz

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冰之雪域 at 2017-03-21 12:22:55
这酶挺好的，扩增速度确实快。你如果担心是扩增速度的原因，可以延长扩增时间，不知楼主的片段有多大，是否为高GC片段，模板是什么？

hbv乙肝病毒环状DNA，扩3.2kb，一次都没扩出来。
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努力做一件事情。。。
6楼2017-03-21 16:03:01
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hxxzhz

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zcliang2014 at 2017-03-21 21:17:06
多年来经验，这个酶是高保真酶，速度确实快，但是——对模版的要求比较高。模板脏的化，不建议用这个。

谢谢！！
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努力做一件事情。。。
9楼2017-03-22 13:07:08
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bdgavv557
10楼2017-08-19 10:35:11
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