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二货的世界

新虫 (正式写手)

[求助] 求助:细胞凋亡,DNA ladder条带讨论。 已有1人参与

目前正在做细胞的早期凋亡研究,采用的方法是DNA片段化的检测。细胞发生凋亡时会形成180-200bp整数倍的寡核苷酸片段,在凝胶电泳上表现为梯形电泳图谱(DNA  ladder),实验采用的是碧云天的抽提式试剂盒提取DNA,该试剂盒可以非常有效的抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder,同时又可以抽取到最大50kbp左右的基因组DNA。采用1%琼脂糖凝胶电泳进行电泳,电压是80V。
参照参考文献泳带应该是主要的基因组分子量比较大,细胞凋亡后条带才会出现在分子量较小的最前端。但是我试剂跑电泳是,不论对照组还是样品组条带主要集中在分子量较小的最前端。
如图二,求大神赐教。是我样品提取有问题呢,还是说我跑胶的条件有问题,但是marker条带没问题呀。

求助:细胞凋亡,DNA ladder条带讨论。
参考文献条带.PNG


求助:细胞凋亡,DNA ladder条带讨论。-1
1.5小时.JPG.JPG
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weijie2013

金虫 (著名写手)

2楼2017-03-21 14:03:01
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weijie2013

金虫 (著名写手)

3楼2017-03-21 14:03:52
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kk1424

主管区长 (著名写手)

中药研究者

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的marker是没问题的,那么问题就在样品,我的想法和楼上一样,样品需要重新来过。
药理毒理
4楼2017-03-21 14:05:52
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二货的世界

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by kk1424 at 2017-03-21 14:05:52
你的marker是没问题的,那么问题就在样品,我的想法和楼上一样,样品需要重新来过。

我也觉得是样品提取问题,但是不知道哪一步骤出了问题,提取时严格按照抽提试剂盒的说明书进行的。
5楼2017-03-21 17:19:27
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kk1424

主管区长 (著名写手)

中药研究者

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主

药理毒理
6楼2017-03-21 18:53:02
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玛格丽特的

铁虫 (小有名气)

请问你做出来了吗后来,我之前一直没做出来,现在又做,你觉得是什么问题呢
7楼2018-06-20 14:11:55
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