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w789xd

新虫 (初入文坛)

[求助] TA克隆及转化不成功 已有1人参与

最近要扩一段未知序列片段,用Ex-Taq酶扩增之后有明显的条带,应该已经默认加了A端,然后按5微solution 1,1微 PMD-19T,4微片段的体系16度反应了30mins。之后转化进了公司的感受态细胞里,涂Amp平板进行蓝白斑筛选,有蓝色菌落,但取白色单菌落进行提质粒和PCR验证都是空的没有结果,求各位大神帮忙分析一下原因。

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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是载体自连了吧,19T很容易自连的~
···
2楼2017-03-20 13:13:21
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wuqianqian

新虫 (初入文坛)

你的片段多大啊,片段跑pcr回收了吗?试剂正常吗?过夜连接试试

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3楼2017-03-20 15:50:00
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麻糖先生

新虫 (初入文坛)

4楼2017-12-02 00:54:07
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