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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » EB如何使用
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hanyu9217

木虫 (正式写手)

[交流] EB如何使用

小弟现在有一事不明
  我以前本科的时候做电泳的时候ＥＢ不是加在胶中的啊
是电泳之后在单独染色
  但是我现在做的是把EB加在胶中  之后的胶配很多 每次用的时候在用微波炉加热。
我想问的是EB在高温会分解，如果EB放在胶里这样做对不对，你们是怎么做的啊 这样做对我的实验有没有影响啊 影响大不大啊



不知道我表达的明白没有啊   帮帮我吧

[ Last edited by 350784478 on 2009-9-19 at 13:08 ]
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1楼 2008-12-27 12:38:10
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
EB放在胶里是可以的
但不是先放EB再加热
那样就分解了
是溶解完了胶之后 等胶冷却但还没凝固的时候
加入EB 然后摇一下

但是个人感觉那样污染会比较严重
我习惯不加在胶里
我都是跑完电泳之后再用EB染胶

[ Last edited by xiaoweiwei121 on 2008-12-27 at 12:55 ]
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2楼2008-12-27 12:54:33
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
一般的实验室里EB是放在胶里,而且是反复加热使用
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3楼2008-12-27 13:07:54
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)
EB加在胶里是有好处的 条带比较清晰 省去染胶的时间 就是比较危险
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4楼2008-12-27 13:18:00
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蓝色基因

金虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1):感谢参与讨论,欢迎常来~ 1-17 14:52
EB可以放胶里面。先煮沸后等凉到不是很烫手的时候加入EB，轻轻混匀，不要太用力，以免出现太多气泡影响胶体凝聚。而且要注意的事，加入EB后摇晃过程中，人要站在上风口，避免吸入带EB的空气。
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5楼2008-12-27 17:45:28
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entomology557

铁杆木虫 (知名作家)
加在胶里，同意1楼和5楼的看法，如果跑完了再加eb，胶都凝固了怎么染色啊？
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生物进化基本常识：一定范围内，选择压力越大，要么进化的越快来适应这种压力，或者直接被淘汰。
6楼2008-12-28 09:16:20
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
胶凝固了也可以染色
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7楼2008-12-28 11:20:32
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

优秀区长优秀区长优秀版主优秀版主
引用回帖:
Originally posted by entomology557 at 2008-12-28 09:16:
加在胶里，同意1楼和5楼的看法，如果跑完了再加eb，胶都凝固了怎么染色啊？


汗

不信你试试
跑完了在放到稀释好的EB里染色10分钟
然后看看是不是能染上

[ Last edited by xiaoweiwei121 on 2008-12-28 at 12:31 ]
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8楼2008-12-28 11:48:24
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kousyouki

铁虫 (小有名气)
可以染色的呀，我们实验室都用了老久的了~~
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9楼2009-01-17 05:57:27
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198619

铜虫 (小有名气)
★
lwf991229(金币+1):感谢参与讨论,欢迎常来~ 1-17 14:53
引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2008-12-28 11:20:
胶凝固了也可以染色

跑完胶之后再染色也可以，把配好的EB加到缓冲溶液或是水中稀释，把胶放入其中30分钟左右就可以，我做过的还可以。
不过本人建议，如果是用EB染色的话，还是加在胶里效果更好
一般是先用微波炉加热溶解琼脂糖，待溶液冷却至50-60度左右，再加一定浓度的EB，最后就是倒胶了。

[ Last edited by 198619 on 2009-1-17 at 11:15 ]
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10楼2009-01-17 11:13:43
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