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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求教HPLC一系列～新手小白摸条件中，各种不明白
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玖月一号

新虫 (正式写手)

[求助] 求教HPLC一系列～新手小白摸条件中，各种不明白 已有1人参与

做的是中药复方的指纹图谱，乙腈和水梯度洗脱，可是下图中基线漂的太厉害了。是我梯度出问题了麽。还是流动相需要改变呢？求各种指点咯。(?>?<?）

求教HPLC一系列～新手小白摸条件中，各种不明白


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1楼 2017-03-18 19:39:59
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玖月一号

新虫 (正式写手)
考虑过自己梯度的问题。可是不知应该怎么改。

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2楼2017-03-18 19:48:16
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huaruishi

新虫 (著名写手)
好像很多东西没分开呀。供试品制备，流动相啥的，慢慢来呗

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3楼2017-03-18 19:55:56
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玖月一号

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by huaruishi at 2017-03-18 19:55:56
好像很多东西没分开呀。供试品制备，流动相啥的，慢慢来呗

前面到45分钟是不是基线漂移？还是因为前面都没分开？之前用甲醇和水作为流动相，也不理想。我根据我之前得的色谱图，把流速改到0.7  前面洗脱时间拉长，比例没变后得到那个图，还有就是不咋清楚咋修改极性。如果峰没分开，是不是应该时间拉长或者流动相的比例极性减小，让后面的峰慢点出来呢？

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4楼2017-03-18 20:20:29
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懒虫红岩

铜虫 (初入文坛)
不知道你的水相里有没有加酸，检测波长短的话，建议不要用甲酸，用0.1%磷酸。

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5楼2017-03-18 20:48:33
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玖月一号

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 懒虫红岩 at 2017-03-18 20:48:33
不知道你的水相里有没有加酸，检测波长短的话，建议不要用甲酸，用0.1%磷酸。

水相里面没有加酸。加磷酸是为了修饰峰形麽。我这色谱图还有的救麽

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6楼2017-03-18 21:52:03
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匿名

禁虫 (知名作家)
本帖仅楼主可见
7楼2017-03-18 22:19:40
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bleach-bin

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玖月一号: 金币+3, ★★★很有帮助 2017-03-19 12:01:00
这个不像是漂移，漂移很多是发生在后面的。更像是前面的东西很多没有分开，很多个峰叠在一起了。首先把乙腈的比例调小，你这个大极性的东西太多，最好先用30-40%的乙腈试试，当然时间要延长。
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8楼2017-03-18 22:20:12
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玖月一号

新虫 (正式写手)
好的。多谢指点，我周一的时候试试。之前乙腈用的是纯乙腈  那我水里要加点磷酸麽～～

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9楼2017-03-18 22:47:53
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玖月一号

新虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by bleach-bin at 2017-03-18 22:20:12
这个不像是漂移，漂移很多是发生在后面的。更像是前面的东西很多没有分开，很多个峰叠在一起了。首先把乙腈的比例调小，你这个大极性的东西太多，最好先用30-40%的乙腈试试，当然时间要延长。

好的。多谢指点，我周一的时候试试。之前乙腈用的是纯乙腈??那我水里要加点磷酸麽～～

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10楼2017-03-18 22:48:20
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