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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 10金币求助——真菌纯化培养操作
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xiyicui

金虫 (小有名气)

[交流] 10金币求助——真菌纯化培养操作

各位虫虫好，请帮忙传授一下真菌纯化的具体操作：
比如用什么工具？
怎样操作？
注意什么事项？
纯化几次？
纯化到菌落是什么样的程度，才算纯化？
谢谢：）

[ Last edited by xiyicui on 2008-12-26 at 15:29 ]
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1楼 2008-12-26 11:37:14
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pph0259

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-8 12:11
引用回帖:
Originally posted by xiyicui at 2008-12-26 12:43:
我以前没有做过，具体操作一点不清楚，导师到也指点过，就是想再向有经验的虫虫讨教讨教具体的步骤。
我现在是先用固体培养基培养出组织上的真菌，等长成圆形菌落时，然后用解剖刀切取一 ...

你不能指望一次就获得纯培养的菌，
要连续转接好几次，每次都是一次纯化的过程，
这样反复几次后，就纯了。
菌是很小的，所以挑的时候，你不能用眼睛判断，
你挑一块你认为看得到的小菌块，
其实里面的菌有上亿个了！！！
包含其他杂菌的概率就高！！！
所以，我们只需要挑一点点，真的只是一点点、一丝丝即可！！！
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9楼2008-12-26 13:47:42
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pph0259

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
xiyicui(金币+1):谢谢参与
xiyicui(金币+1,VIP+0):谢谢：）
xiyicui(金币+1,VIP+0):谢谢啊，我想了解的再具体一些。
这个有特殊讲究吗？
还不是连续划线（稀释），得到单菌？
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3楼2008-12-26 11:49:53
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普通回帖

feijicao

银虫 (正式写手)
★ ★
xiyicui(金币+1):谢谢参与
xiyicui(金币+1,VIP+0):你丫头的倒是动作快的很
   我来领金币啦！！！
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2楼2008-12-26 11:44:15
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pph0259

木虫 (正式写手)
怎么刚提交就有金币呢？
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4楼2008-12-26 11:50:23
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xiyicui

金虫 (小有名气)
我以前没有做过，具体操作一点不清楚，导师到也指点过，就是想再向有经验的虫虫讨教讨教具体的步骤。
我现在是先用固体培养基培养出组织上的真菌，等长成圆形菌落时，然后用解剖刀切取一块没受感染的菌丝块，但是纯化效果很不好。
老师说要用解剖针或镊子挑一点，或者划之字，纯化效果才好。因为老师方向不是这方面的，所以想再确认一下。
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5楼2008-12-26 12:43:58
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T-MAC3808

木虫 (著名写手)
★ ★
xiyicui(金币+1):谢谢参与
xiyicui(金币+1,VIP+0):谢谢：）
找着看
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我允许你走进我的视线， 但不允许你在我的视线里走来走去！ 人生重要的不是所站的位置， 而是所朝的方向
6楼2008-12-26 12:45:29
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bulebird

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
xiyicui(金币+1):谢谢参与
xiyicui(金币+1,VIP+0):谢谢啊，可能是我操作不规范，才总纯化不好吧
amisking(金币+3,VIP+0):欢迎发帖交流！ 8-8 12:10
是什么真菌？酵母还是霉菌？对于酵母，可在YEPD液体培养基中分离，将pH调低，并加入青霉素等抑制细菌的生长，培养12-24h，然后转接，转接3-4次后，再进行平板分离。霉菌的话，就挑取菌丝进行纯化。不管什么菌，都要纯化到没有杂菌。
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7楼2008-12-26 12:48:00
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月月大可

木虫 (著名写手)
★
xiyicui(金币+1):谢谢参与
看是什么菌污染，如果是细菌污染你就在培养基冷却到不烫手的时候加入一些抑制细菌生长的抗生素，链霉素应该就可以。然后倒平板，在此培养基上接上你要纯化的真菌就可以了。
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8楼2008-12-26 12:49:09
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xiyicui

金虫 (小有名气)
那怎样才能把一个菌落里所有的可能存在的真菌都分离到呢？
我主要的目的还不是纯化出一种来，我的任务是把存在的菌尽可能都分离出来。谢谢：）
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10楼2008-12-26 14:12:31
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