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我是拟南芥

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR扩增出多条带!

我是研究柑橘的,首先根据甜橙基因组,找到该基因的序列,大概3K,设计引物。在柑橘的一个品种A(不是甜橙)中扩增该基因.发现出现三条带,1K,3K和大于3K的。这个A品种是由B和C杂交而来的后代。我怀疑A中有不同的转录本。所以在B和C中也扩增了该基因,发现B中有两天带,3K的和大于3K的。而C中有一条带,小于3K。所以会不会是两者杂交,将各自的片段带入子代,造成扩增上的差异。还是说我的引物和模板不好。模板混入了基因组DNA,扩增出大的片段。引物不好,扩增出小的片段。还有就是,三条带由于太浅,回收浓度不高,难以连接载体测序,不知各位同仁有何建议?关于这个基因该何去何从?不知道我的问题说清楚了没?谢谢回答

@biostar2009 @飞约疯人院 @wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端
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