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liudongxijun

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先你要做一个BL21培养的生长曲线,根据生长曲线在对数期加入IPTG(0.1-0.6 mM),如果有包涵体最好是在16-20℃低温诱导,加入IPTG后,菌种本身就是不以生长为主,以蛋白表达为主,LB培养大肠,本身OD就不会太高。不要听他们说在OD 1.5时诱导,一定要在对数期(OD 0.6-0.8)诱导,因为本身LB摇瓶就是这样一个定性实验,先把酶表达出来再说。
11楼2017-03-21 10:16:07
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氺泽兮木兰

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by liudongxijun at 2017-03-21 10:16:07
首先你要做一个BL21培养的生长曲线,根据生长曲线在对数期加入IPTG(0.1-0.6 mM),如果有包涵体最好是在16-20℃低温诱导,加入IPTG后,菌种本身就是不以生长为主,以蛋白表达为主,LB培养大肠,本身OD就不会太高。 ...

低温诱导是为了让菌多以可溶性蛋白表达吗?

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12楼2017-03-24 20:57:31
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我是骆驼

金虫 (正式写手)

诱导的有点早,菌主要产蛋白而不是生长  繁殖,所以,od低,菌少。

发自小木虫Android客户端
多学习多交流
13楼2017-03-25 09:35:41
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