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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助关于考马斯亮蓝染色液
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 求助关于考马斯亮蓝染色液

我做SDS-PAGE检测蛋白表达。
考马斯亮蓝R-250染色液配方如下：
考马斯亮蓝R-250    1g
250ml 异丙醇
100ml冰醋酸
加650去离子水
请教高手这个配方可以吗？
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
1楼 2008-12-25 19:24:34
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
关键要过滤
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2楼2008-12-25 19:34:49
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pinene3862

银虫 (正式写手)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~`
加1克硫酸铜效果更好。
楼上说的是对的，配好后要过滤。不用太仔细，我每次只在漏斗上放薄薄的一小片棉花就可以了。
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3楼2008-12-25 22:09:55
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
我是用滤纸过滤的
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4楼2008-12-25 22:40:27
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gr0613

铁虫 (初入文坛)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~`
压根不用过滤，用前关键要放到烘箱烘一下，拿出来后再染，一般的SDS-PAGE胶几分钟就染上，我最快的时候是不到一分钟染出条带，立刻脱色
关键是冰醋酸
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5楼2008-12-25 23:51:32
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~`
我没过滤也照用……
关键看考马斯亮蓝的纯度
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6楼2008-12-25 23:51:53
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Anson1358

铁杆木虫 (著名写手)
谢谢各位虫友，我的结果出来啦，实践证明这种配方是可以的。由于我点样量比较少，刚开始脱色时没有看到条带，我以为是染色液的问题呢，因为很多书上都不是这样配的。不过最后还是看到条带啦。
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一个人可以不成功，但不可以不成长！
7楼2008-12-26 08:04:27
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zengfuxing

银虫 (小有名气)
哈哈，估计没有人比我更裸了，我的方法是只加考马斯亮蓝，溶于水，不抽滤，不加醋酸、醇等，染色煮2min，照样是一样的结果！哈哈！
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8楼2008-12-26 12:26:59
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