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风定云安

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】为什么我做不出抑菌圈？ 我是一名本科生，正在做毕业... 已有2人参与

【求助】为什么我做不出抑菌圈？
我是一名本科生，正在做毕业实验，题目是酵母发酵中药抑菌，用的是滤纸片法。大致过程就是把15g磨成细粉的中药浸泡一小时后用三煎法蒸发浓缩至15mL使药液的浓度为1g/mL，在药液中加入酵母进行发酵，然后把在药液中充分浸泡的纸片放在涂布了大肠杆菌的平板上观察其抑菌圈的大小。问题是，不管是多少浓度的药液，不管有没有经过发酵，我的滤纸片都出不来抑菌圈。我用的中药是黄芪，但是根据资料上说的，黄芪是一定可以抑制大肠杆菌的一种中药，这是怎么回事呢？

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1楼 2017-03-14 10:41:23
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tams137

铁虫 (小有名气)
滤纸片浓度高不哪儿去，用抑菌杯法

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2楼2017-03-14 11:11:29
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tams137

铁虫 (小有名气)
牛津杯或者打孔，直接加抑菌液

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3楼2017-03-14 11:13:36
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风定云安

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tams137 at 2017-03-14 11:13:36
牛津杯或者打孔，直接加抑菌液

打孔或者牛津杯法加药液以后是不是为了防止药液流下来，平板是不是就只能正放，不能倒置培养了？如果不倒置，平板不会长菌吗？

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4楼2017-03-14 21:50:34
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tams137

铁虫 (小有名气)
不会，倒置培养主要是考虑水分蒸发，当然染菌也要稍微注意

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5楼2017-03-14 23:27:01
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
4楼: Originally posted by 风定云安 at 2017-03-14 21:50:34
打孔或者牛津杯法加药液以后是不是为了防止药液流下来，平板是不是就只能正放，不能倒置培养了？如果不倒置，平板不会长菌吗？
...

纸片法是用来做抗生素药敏试验的，纸片上抗生素的浓度是很高的，你的中药或发酵物浓度能有多高呢，没抑菌圈很正常，所以还是用打孔或牛津杯比较好，大肠杆菌不倒置完全可以长出来，而且长得特别好
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6楼2017-03-15 14:39:44
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DNA守望者

新虫 (初入文坛)
有没想过中药效果不靠谱

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7楼2017-03-16 08:33:44
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DNA守望者

新虫 (初入文坛)
1g/ml浓度已经很高了，也没有圈就是没有了。另外用有机溶剂提取试试。

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8楼2017-03-16 08:35:14
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zxlhy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by DNA守望者 at 2017-03-16 08:35:14
1g/ml浓度已经很高了，也没有圈就是没有了。另外用有机溶剂提取试试。

三方面：1.提取的中药浓度不够，换有机溶剂提取，中药完全可以达到抑菌效果的。
             2.可能涂布的大肠杆菌的CFU数过多
             3.大肠杆菌可以和换个菌种，可能你用的这个大肠杆菌有耐药基因。
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离一切相
9楼2017-03-17 22:04:43
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南山在我心

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tams137 at 2017-03-14 11:13:36
牛津杯或者打孔，直接加抑菌液

您好，我不知道如何控制菌液浓度，感觉摇菌10h，再加200微升，菌会长很浓，而且用牛津杯法正放时，水滴的低落影响效果的问题怎么解决，谢谢啊
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10楼2017-03-21 17:41:18
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