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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 关于拟南芥t0代种子抗性筛选问题
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叶∏_∏

新虫 (小有名气)

[交流] 关于拟南芥t0代种子抗性筛选问题

农杆菌侵染过后的拟南芥种子，播种在潮霉素的筛选培养基上，潮霉素浓度用的是30mg/L，但是已经放了一个月了，有个培养皿上的植物有绿的，也有黄的，但是仍然是绿色的那些植株，根依然很短，之前查了一下说是，潮霉素是抑制生长了，不知道是不是因为浓度太高，把有抗性的也抑制了，或者说那些绿色的，也不是阳性转基因的苗？

关于拟南芥t0代种子抗性筛选问题


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1楼 2017-03-13 09:30:30
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叶∏_∏

新虫 (小有名气)
还有个问题就是，如果需要用浓度梯度去选择一个最佳浓度梯度，那么达到怎么样的效果，才算是最佳的呢？

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2楼2017-03-13 09:32:01
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理工学霸

金虫 (小有名气)
潮霉素筛选不是太好。做个梯度，先做个预实验

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hello
3楼2017-03-13 15:58:50
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叶∏_∏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 理工学霸 at 2017-03-13 15:58:50
潮霉素筛选不是太好。做个梯度，先做个预实验

那做浓度梯度去筛选的话，达到怎样的效果才算是最佳的？

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4楼2017-03-13 17:31:14
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理工学霸

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 叶∏_∏ at 2017-03-13 17:31:14
那做浓度梯度去筛选的话，达到怎样的效果才算是最佳的？
...

用wt做梯度，与没有添加潮霉素的MS对照，至少一半以上表型不一致即可。主要观察子叶颜色和根长。

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hello
5楼2017-03-14 00:16:38
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叶∏_∏

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 理工学霸 at 2017-03-14 00:16:38
用wt做梯度，与没有添加潮霉素的MS对照，至少一半以上表型不一致即可。主要观察子叶颜色和根长。
...

是要用野生型做梯度哇~有点明白了，那我试试去，若再遇到问题再来请教，多谢了*^_^*

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6楼2017-03-14 09:29:36
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你太善良

新虫 (著名写手)
浓度问题不大，在等几天，没有应该就没有阳性了。

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7楼2017-03-14 10:20:42
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唐双双diana

新虫 (初入文坛)
想知道你是怎么做的？我做的时候种子发不了芽？你种子怎么消毒的？可以说下吗？

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8楼2017-06-15 22:57:16
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亲爱的花花

新虫 (初入文坛)
楼主现在怎么解决的 我也遇到这样的问题  做梯度以后效果怎么样

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9楼2017-06-30 23:56:42
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赵姑娘的喜忧

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 唐双双diana at 2017-06-15 22:57:16
想知道你是怎么做的？我做的时候种子发不了芽？你种子怎么消毒的？可以说下吗？

我是跟您一样的问题，您的问题怎么解决的？

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10楼2018-09-09 22:56:59
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