24小时热门版块排行榜    

查看: 1309  |  回复: 3

c8899747

新虫 (初入文坛)

[交流] dATP在T4连接中的作用 已有2人参与

最近做T4连接,检测出来的全部都是空载,把酶之类的都验证了,发现都没有问题,唯一的就是T4处理过程中的dATP了,想问问dATP在这个过程中的作用,非常感谢

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nbu-zww

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
T4处理完了要做Dna回收,直接用的话载体也被磷酸化了,载体自链接了。另外,载体酶切完了要ciap

发自小木虫IOS客户端
2楼2017-03-12 21:11:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

c8899747

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by nbu-zww at 2017-03-12 21:11:58
T4处理完了要做Dna回收,直接用的话载体也被磷酸化了,载体自链接了。另外,载体酶切完了要ciap

T4处理完后做过回收,以前一直都是用T4的方法做连接,这次突然出现这种状况,很头疼,把所有的酶都做验证了,都没有问题,就剩下dATP没有验证了,准备做dATP的验证。因为我是觉得如果dATP降解了应该不会有阳性克隆纯在,虽然说大批载体自连,但是偶尔有个别的阳性。

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-03-12 22:44:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

547star

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
应该是ATP不是dATP。ATP提供能量。缓冲液放久了,加点ATP可以提高酶催化连接的能力。
为什么
4楼2017-03-13 16:02:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 c8899747 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见