24小时热门版块排行榜    

查看: 932  |  回复: 16
当前主题已经存档。

annwt

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by house at 2008-12-27 17:37:
土壤DNA提取关键是污染物的去除,一般需要的是PVPP或是PVP(聚乙烯聚吡咯烷酮)。

  周的方法只是一般的提取DNA的方法,用于土壤DNA的话成功率不高。

PVP K30 可以吗?
11楼2008-12-28 09:16:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

house

银虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 微笑漩涡 at 2008-12-28 00:23:



我用还没有失败过呢,不过提取出来的DNA呈褐色甚至深褐色,要酶切或者PCR的话要纯化。

提出来的DNA是拿来用的,我这里指的失败就是说提出来的DNA不能用。

你加入了另外的纯化步骤,那是另一回事。但是需要说明给别人呀!不然别人照你的方法不就抓虾了。
12楼2008-12-28 13:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

house

银虫 (正式写手)

土壤DNA由于含有腐殖酸,这个东西抑制分子生物学反应,而且会造成DNA降解。所以土壤DNA的提取一定要把腐殖酸去除才能进行后面的操作。

腐殖酸的去除有很多方法,复杂的有使用层析柱的、简单的有使用羟基磷灰石的、也有使用PVPP或PVP直接吸附腐殖酸。

这些要根据你的实验目的的不同选择方法。

如果只是作PCR 16S基因作生态学分析,那么在提取缓冲液中简单的加入PVPP吸附腐殖酸就可以了。PVP的效果不如PVPP(PVPP不可溶)
13楼2008-12-28 13:36:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

annwt

木虫 (正式写手)

细菌的细胞壁真是那吗难击破吗?
植物细胞就用研磨就可以,

有人用过超声波破碎的吗?
14楼2008-12-29 20:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhyyk10

金虫 (小有名气)

那是因为量太少,上样电泳EB染色亮度不够所以看不到条带
相信自己!
15楼2009-01-01 19:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gogo926

银虫 (小有名气)

看周的方法
文章:Extraction of DNA from soil。European Journal of Soil Biology 39 (2003) 183–190
我试过,对土壤的效果还不错
16楼2009-01-07 21:48:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小小木虫8580

金虫 (小有名气)

QBIOGENE的bio101试剂盒专门针对土壤DNA提取的。现在应该算是MP公司下属的产品Fastprep?可能拼错了,呵呵
土壤DNA提取主要是腐植酸的干扰较大,有时候就算你提取到DNA也很难成功PCR扩增。目前我们实验室主要还是用qbiogene的试剂盒,不过只用他们一个纯化的试剂bindmatrix,效果很不错
17楼2009-01-07 22:25:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 annwt 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华理,数一英一285求A区调剂 +4 AZMK 2026-03-25 6/300 2026-03-26 16:12 by 王小欠i
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +6 y7czhao 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:42 by zyxyz0804
[考研] 一志愿 南京邮电大学 288分 材料考研 求调剂 +3 jl0720 2026-03-26 3/150 2026-03-26 13:39 by zzll406
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +6 jiajunX 2026-03-22 6/300 2026-03-25 23:05 by licg0208
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
信息提示
请填处理意见