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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 求助啊！蛋白质磷酸化改性问题！
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落日的薰衣草

新虫 (初入文坛)
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求助啊！蛋白质磷酸化改性问题！
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目前在做乳清分离蛋白磷酸化改性，用的三聚磷酸盐。在测定磷酸化程度时，用的是edta滴定法。用pH7.4的磷酸盐缓冲液溶解蛋白质，然后加三氯乙酸，离心，取上清液加入乙酸锌，再加pH10氨缓冲液溶解沉淀，加铬黑T，用EDTA滴定。现在的问题是空白组加入乙酸锌以后有沉淀，怀疑是磷酸盐缓冲液中的磷酸二氢钠和乙酸锌反应生成了磷酸二氢锌，换成用蒸馏水溶解改性蛋白质以后加入乙酸锌没有沉淀。而且加入了氨缓冲液以后有絮状物，按理来说应该是澄清液体的。滴定的时候铬黑T也没有变色。求问大神这种情况是什么原因？怎么解决？是不是磷酸化改性的时候蛋白质没有磷酸化？

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1楼 2017-03-10 12:02:57
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IIIIIII2楼
2017-03-10 12:03   回复  
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lhsyfh3楼
2017-03-10 12:03   回复  
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小夹子2064楼
2017-03-10 12:03   回复  
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sc1875楼
2017-03-10 12:03   回复  
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ly8206864006楼
2017-03-10 12:03   回复  
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