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forget1997

银虫 (小有名气)

[交流] 酶切的图片,专家来瞅瞅

我用KpnI和NheI双酶切我的PCR产物和pGL3质粒,准备连接。下面是我跑胶的图片。左边四个是PCR产物,右边两个是vector。
专家们来瞅瞅,跑成这样是否正常?
我加了2ug的PCR产物,2ug的vector。
前面亮亮的一团,是不是切下来的片段?我不是很敢确定。
小声的问一句,是不是PCR产物太多了?我担心没有切完全。

[ Last edited by forget1997 on 2008-12-24 at 13:38 ]
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ljsh

铁杆木虫 (著名写手)


forget1997(金币+1,VIP+0):3Q
没有切开.
预期的目的片段没有出现.
2楼2008-12-24 15:05:32
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)


forget1997(金币+1,VIP+0):3Q
Nhe1很难切的
3楼2008-12-24 15:26:59
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户


forget1997(金币+1,VIP+0):3Q!
人家跑的是载体,当然没有什么  预期的目的片段  了。跑胶的时候把对照什么的都点全了,如果载体切之前是多条带,切后变一条了就说明可以了,当然楼上说的情况就不一定了。对于产物来说通常琼脂糖胶没办法确定,除非跑个page胶看看大小是不是变了。
金币是赌出来的
4楼2008-12-24 15:46:16
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

为什么不加个空质粒对照跑下电泳,这样说不清楚的
2ug DNA在50ul酶切体系中是ok的,切一个小时(NEB的酶)
5楼2008-12-24 18:19:04
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