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yue一缕阳光

新虫 (初入文坛)

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[交流] 稳转细胞系构建

有人用pcDNA3.0质粒构过稳转细胞系吗，都用的什么细胞呀

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1楼 2017-03-08 16:39:18

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萝卜涨价了

铜虫 (初入文坛)

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★
yue一缕阳光(金币+1): 谢谢参与

CHO或者HEK293T细胞都可以吧
利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染，外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少，能够满足小量蛋白制备，大量生产成本很高。相对于此，稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上，随着细胞的生长分裂外源基因可以稳定转染表达，同时经过抗生素加压筛选，最终得到能够稳定转染表达蛋白的细胞株，稳转株生产蛋白稳定性更好，批次差异性更小。