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yue一缕阳光

新虫 (初入文坛)


[交流] 稳转细胞系构建

有人用pcDNA3.0质粒构过稳转细胞系吗,都用的什么细胞呀

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铜虫 (初入文坛)



yue一缕阳光(金币+1): 谢谢参与
CHO或者HEK293T细胞都可以吧
利用哺乳动物系统生产蛋白的方式有两种:瞬时转染和稳转株筛选。通过稳定细胞系构建筛选稳定表达细胞株。针对瞬时转染,外源基因在短时间转录翻译得到的蛋白量较少,能够满足小量蛋白制备,大量生产成本很高。相对于此,稳定转染的是将外源基因整合到细胞自身的基因组上,随着细胞的生长分裂外源基因可以稳定转染表达,同时经过抗生素加压筛选,最终得到能够稳定转染表达蛋白的细胞株,稳转株生产蛋白稳定性更好,批次差异性更小。
5楼2018-04-20 09:38:49
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syhorchid2楼
2017-03-08 16:49   回复  
yue一缕阳光(金币+1): 谢谢参与
syhorchid3楼
2017-03-08 16:49   回复  
yue一缕阳光(金币+1): 谢谢参与
nono20094楼
2017-03-08 21:46   回复  
yue一缕阳光(金币+1): 谢谢参与
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