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Nrf2与KEAP1免疫共沉淀中遇到的问题
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| 在做Nrf2和Keap1的Co-IP,但是重复多次仍然无明显的相互作用(两者均过表达,用Keap1拉的Nrf2,最后树脂上有Keap1而没有Nrf2),不知道是不是Nrf2在实验过程中受到泛素化而降解了,还是Nrf2选择的条带不对(用Sanrta的SC-722,100KD处转膜,在全细胞裂解液(裂解之后马上加loading处理)中可以看到明显条带,但是经过IP后再处理的样品则无条带),请问各位大神在做的时候是会加入泛素化酶抑制剂MG132这种,还是我选择的条带错了,谢谢各位了 |
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