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zgmmyp

金虫 (小有名气)

[交流] SDS-PAGE电泳时间过长的原因!?

最近跑12%的分离胶,比以前用时间长了好多!为什么啊?其主要影响因素是什么啊?是缓冲液的pH吗?还由于温度太低的缘故?我跑分离胶的电压是120V,以前只用1.5个小时就完!现在要用2个小时多才跑完,请问这是为什么啊?Sample Text
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

检查各种buffer的离子强度(有无反复调pH)和pH值
很可能是缓冲能力不够引起的
2楼2008-12-23 15:56:37
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jasco

木虫 (正式写手)

buffer是新配的么?估计buffer有影响
3楼2008-12-23 15:57:11
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linruxin

金虫 (小有名气)

上槽漏液,慢慢的上槽液没满过梳子孔吧?
4楼2008-12-23 16:47:15
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zgmmyp

金虫 (小有名气)

buffer我都是新配置!就是调PH的时候温度也比较低,大约在13度左右。我没有加热到25°。我就在13°把buffer调到6.8、8.8和5*电泳缓冲液的8.3 。还有一个就是,在调6.8的时候调过了 然后我游泳NAOH调回来的。这个是不是影响很大啊?
5楼2008-12-23 16:51:12
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zgmmyp

金虫 (小有名气)

我随时在观察    没有发现漏液!
6楼2008-12-23 16:53:24
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

调过了就重新配吧,不要来回调~~离子强度不对,对电泳的影响最大
pH差0.x不算什么,但是离子强度错就很恶心
7楼2008-12-23 18:18:55
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zgmmyp

金虫 (小有名气)

ph6.8的那个缓冲液就是用来配制浓缩胶    影响液这么大吗?
8楼2008-12-24 13:54:05
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