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如何确定扩增想要的片段 已有1人参与
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最近学到pcr部分。突然想到一个问题。 普通pcr在延伸阶段，模板DNA如果包含目的片段的同时还有一段延伸。是否也会把延伸扩增出来？ 复性的时候形成两个链引物之间扩增出来的结合了。引物侧翼的不结合？ 在我的理解中是通过延伸时间来控制长短。 这样的理解是否正确？ 还是用酶切的方法直接精准的切割下包含目的片段的片段。然后环化，整段扩增？ 查遍资料也没有对这一部分内容的准确描述。故斗胆求解。 发自小木虫Android客户端 |
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绝对零度的笑
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【答案】应助回帖
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念念一白: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 很有帮助，谢谢 2017-03-07 10:04:44
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| PCR的产物特异性是由引物决定的，这也是为什么需要一对引物的原因，前面几个循环也许会形成你所说的加长延伸片段，但是随着链式反应的进行，这部分带延伸片段的模板在总体模板中的比例越来越低（因为被两条引物“包抄夹住”的片段比例会越来越多，呈指数增长）。最终产物会以引物之间的序列占绝对比例，原始模板和前几个反应的延伸片段比例几乎可以忽略不计。 |
2楼2017-03-07 01:48:05
3楼2017-03-07 10:01:24