| 查看: 1304 | 回复: 2 | ||
[求助]
如何确定扩增想要的片段 已有1人参与
|
|
最近学到pcr部分。突然想到一个问题。 普通pcr在延伸阶段，模板DNA如果包含目的片段的同时还有一段延伸。是否也会把延伸扩增出来？ 复性的时候形成两个链引物之间扩增出来的结合了。引物侧翼的不结合？ 在我的理解中是通过延伸时间来控制长短。 这样的理解是否正确？ 还是用酶切的方法直接精准的切割下包含目的片段的片段。然后环化，整段扩增？ 查遍资料也没有对这一部分内容的准确描述。故斗胆求解。 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有258人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复
-
BT投稿with editor状态快两周了，正常吗
已经有25人回复
-
Silevertinib（BDTX-1535）结构拆解：炔基双环片段为何成为合成瓶颈
已经有0人回复
-
RO4929097 解析：双苯并氮杂䓬骨架与 Notch 通路实验设计要点
已经有0人回复
绝对零度的笑
木虫 (正式写手)
- 应助: 41 (小学生)
- 金币: 3155.8
- 散金: 26
- 红花: 6
- 帖子: 899
- 在线: 95.8小时
- 虫号: 245021
- 注册: 2006-04-22
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-07 07:31:09
念念一白: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 很有帮助，谢谢 2017-03-07 10:04:44
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-03-07 07:31:09
念念一白: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 很有帮助，谢谢 2017-03-07 10:04:44
| PCR的产物特异性是由引物决定的，这也是为什么需要一对引物的原因，前面几个循环也许会形成你所说的加长延伸片段，但是随着链式反应的进行，这部分带延伸片段的模板在总体模板中的比例越来越低（因为被两条引物“包抄夹住”的片段比例会越来越多，呈指数增长）。最终产物会以引物之间的序列占绝对比例，原始模板和前几个反应的延伸片段比例几乎可以忽略不计。 |
2楼2017-03-07 01:48:05
3楼2017-03-07 10:01:24