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yyr_anal

新虫 (初入文坛)

[求助] 高效液相色谱 已有2人参与

反相液相色谱型号:Waters2695
1.用梯度洗脱时应该怎样设置方法组呢?流动相:甲醇和水,比如说45%v/v甲醇0-10min,55%v/v甲醇10-20min,80%v/v甲醇20-50min,100%v/v甲醇50-60min。
2.液相操作后剩下的流动相可否过滤后再次使用,如果可以,70%的甲醇和10%的甲醇是用有机膜过滤还是水膜过滤呢?
  由于刚刚开始接触液相色谱,很多东西都不太明白,希望大家多多帮助!谢谢!
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

如果是empower3fr2的版本,在主界面的编辑下拉列表中选仪器方法,在2695模块里进行仪器方法设置,然后保存,在这个界面的文件选项卡中,选倒数第二个,用方法组保存。如果是empower3老版本,在主界面编辑下拉列表新建方法组里建方法组。  剩下的流动相中,水就直接扔了,甲醇可以直接用。只要流动相中加了有机相就全部用有机相滤膜

发自小木虫Android客户端
2楼2017-03-05 00:36:06
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yyr_anal

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lifucheng at 2017-03-05 00:36:06
如果是empower3fr2的版本,在主界面的编辑下拉列表中选仪器方法,在2695模块里进行仪器方法设置,然后保存,在这个界面的文件选项卡中,选倒数第二个,用方法组保存。如果是empower3老版本,在主界面编辑下拉列表新 ...

剩下流动相中加了水的还是可以重新过滤使用吗?走基线的时候不稳,基线漂移,开始向上漂移然后向下漂移,平衡几分钟又向上漂移是什么原因呢?谢谢啦!
3楼2017-03-05 15:52:12
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柳絮虫

新虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yyr_anal at 2017-03-05 15:52:12
剩下流动相中加了水的还是可以重新过滤使用吗?走基线的时候不稳,基线漂移,开始向上漂移然后向下漂移,平衡几分钟又向上漂移是什么原因呢?谢谢啦!...

基线不稳定,水相再次超声脱气。或者换水
4楼2017-03-05 18:37:23
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by yyr_anal at 2017-03-05 15:52:12
剩下流动相中加了水的还是可以重新过滤使用吗?走基线的时候不稳,基线漂移,开始向上漂移然后向下漂移,平衡几分钟又向上漂移是什么原因呢?谢谢啦!...

您是预混的流动相还是把甲醇、水分别放在机器上 让仪器自动混合? 如果是预混的流动相 存放过久可能会造成有机相的挥发  这会导致色谱峰保留时间的漂移 所以流动相存放时间不要太久  在预混的流动相中加水 各组分的比例将不准确 所以不建议  后面一个问题上图 没有图的情况下我不想乱忽悠
5楼2017-03-05 21:02:46
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yyr_anal

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lifucheng at 2017-03-05 21:02:46
您是预混的流动相还是把甲醇、水分别放在机器上 让仪器自动混合? 如果是预混的流动相 存放过久可能会造成有机相的挥发  这会导致色谱峰保留时间的漂移 所以流动相存放时间不要太久  在预混的流动相中加水 各组分的 ...

就是这个基线,一下子直接向下然后平稳几分钟又缓慢向上漂移。
高效液相色谱
6575BBA06E3CA9ADC7715D5125F3B44F.jpg


高效液相色谱-1
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6楼2017-03-06 15:11:05
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vanorazhao

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
含有有机相的溶液在过膜的时候都要用有机相的膜。水相的膜遇到有机相的时候就溶掉了,楼主可以往水相膜上滴一些有机溶剂看一下现象。甲醇水溶液可以使用3、4天吧,过膜后可以使用的。不过有waters 的工程师说国产的滤膜质量不太好,过滤的时候反而会带来杂质……
7楼2017-03-06 17:03:39
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yyr_anal at 2017-03-06 15:11:05
就是这个基线,一下子直接向下然后平稳几分钟又缓慢向上漂移。

6575BBA06E3CA9ADC7715D5125F3B44F.jpg

FFF609F9817AB2D57F02100E5CCEA624.jpg
...

个人觉得这个不算问题吧 感觉是基线放的太大引起的 而且您这个是2475荧光检测器 不能按紫外检测器的规律来看

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2017-03-06 22:17:59
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yyr_anal

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by lifucheng at 2017-03-06 22:17:59
个人觉得这个不算问题吧 感觉是基线放的太大引起的 而且您这个是2475荧光检测器 不能按紫外检测器的规律来看...

那是不是改变坐标就可以了啊?荧光和紫外的规律有什么不一样呢?
9楼2017-03-08 09:29:26
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xuchao7447

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

如果是已经超声过的放置个一两天继续用的话超不超声没什么太大影响。只要是溶剂有有机相就全部用有机滤膜,我以前用过水膜过20%乙醇的,直接就溶掉了,至于国产滤膜质量问题这个说的太武断了吧,国产货没这么挫的。
生活就是如此
10楼2017-03-08 13:36:00
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