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May_83

金虫 (小有名气)

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[交流] 用凝胶色谱测定高分子量

请教各路大虾：有谁曾经测定过或知道怎么用凝胶色谱测定聚丙烯酰胺的分子量？能否告知小妹一声选用什么柱子？用什么淋洗液？在什么条件下测定？

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1楼 2008-12-22 21:39:32

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long_1102008

木虫 (著名写手)

小木虫驻华代表之觉悟者

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不是很懂，得看仪器吧，溶剂好像有限制的，我们的GPC只能用THF，感觉只要是线形的，可以用PS做基准的都可以测了吧！！

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不应问生处，宜问其所行，微木能生火，卑贱生贤达

2楼2008-12-22 23:24:24

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cuiwhu

至尊木虫 (小有名气)

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★
May_83(金币+1,VIP+0):谢谢

聚丙烯酰胺溶于水，应该用水（加盐）作流动相，PEG，pullulan或聚丙烯酸作标样。
水相GPC柱就那么几家外国公司的，一问代理便知，都不便宜，国产的还没听说。
需要注意的是选择合适分子量范围的柱子，能够覆盖所测定的聚丙烯酰胺分子量。

[ Last edited by cuiwhu on 2008-12-23 at 14:57 ]

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3楼2008-12-23 09:10:49

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后后266

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★
May_83(金币+1,VIP+0):谢谢

用过凝胶色谱柱测定蛋白质分子量大小，用的是TSK柱，不过，到底是选G 2000SW,G3000SW ,G4000SW之类的，看你样品的分子量范围。柱子有点贵，1W多人民币。流动相用PBS盐溶液。

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4楼2008-12-23 13:18:09

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