24小时热门版块排行榜    

查看: 604  |  回复: 6
当前主题已经存档。

zqt123_1981

木虫 (小有名气)

[交流] PCR产物电泳呈M型咋回事?

本人最近做RAPD,PCR产物电泳图呈波浪M型而不是一直线怎么回事?随机引物很少扩增出接过来,在94度变性没有任何条带后来96度变性有个别条带(温度高不高啊?)我的体系有没有问题

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-23 at 13:23 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

donna181

金虫 (小有名气)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 8-22 13:12
PCR电泳成M型可能是缓冲液的问题,或者是电压太大,可能试着换下缓冲液,另外,你的体系是多少,PCR程序可以勇参考一下这里的:95度,2分钟,94度,30秒,退火,30秒,72度延伸(具体以产物长度确定时间),另外,使用的酶有没有问题,请仔细检查一下.
2楼2008-12-22 11:20:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqt123_1981

木虫 (小有名气)

我的程序是96℃,5min;94℃,50S,36℃ 45S,72℃,90S,40次循环
20ul体系 TAkaRa Taq 酶2U,原来用的100V,1小时,今天80V 80min钟
感觉还是不行,而且我的条带很少 ,RAPD随机引物能扩增出挑带的很少
3楼2008-12-23 13:54:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqt123_1981

木虫 (小有名气)

我的RAPD电泳图

两张图片除了引物不同其它条件都相同,每两个孔一个引物RAPD随机引物怎么扩不出东西来啊 感觉别人做的条带都很多啊
4楼2008-12-23 14:05:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

charon1982

铁杆木虫 (著名写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0): 8-22 13:12
可能电泳缓冲液有问题,还有就是你倒胶的时候倒的不好,不平,或者没有等胶冷却就倒了
帮助虫友,提升自己
5楼2008-12-23 21:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanshg2002

新虫 (初入文坛)

谢谢,有收获,看来电泳也大有学问
6楼2008-12-31 00:56:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjl2008bio

铜虫 (初入文坛)


司马诸葛(金币+1,VIP+0): 8-22 13:12
有点m型是正常的,就是点样孔做得不是很好或者是电压不是很稳定。至于没有条带,一般来说就是没有扩增出来,不考虑电泳体系的原因。扩增不出来的原因很多,先换taq酶和缓冲液,再考虑引物和模板。
7楼2008-12-31 10:35:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zqt123_1981 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +5 小小甜面团 2026-03-25 5/250 2026-03-26 21:10 by plmuchong
[考研] 材料学硕333求调剂 +5 北道巷 2026-03-24 5/250 2026-03-26 20:50 by sanrepian
[考研] 341求调剂 +4 青柠檬1 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:34 by 不吃魚的貓
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +7 丹青奶盖 2026-03-26 7/350 2026-03-26 19:18 by macy2011
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂推荐 +4 清酒714 2026-03-26 5/250 2026-03-26 17:49 by fmesaito
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 石河子大学(211、双一流)硕博研究生长期招生公告 +3 李子目 2026-03-22 3/150 2026-03-22 21:01 by 怎么释怀
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见