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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助：PCR扩增不出条带
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by labglion at 2017-03-09 15:43:44
这几天尝试过你说的这种方法，还是没有扩增出来。我怀疑不是引物的问题，因为真的已经尝试过了对很多引物了，有自己设计的，也有文献上的。这么多引物，总该有合适的吧？...

不是引物的问题，就是模板和酶了，模板重做做，酶用的哪家公司的？

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11楼2017-03-09 20:37:00
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labglion

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 中洪小刘 at 2017-03-09 17:25:40
您好，有考虑过专业的生物公司提供帮助吗，我这边希望能帮到您！

暂时不是很需要，我希望通过多了解这方面的知识从而发现和解决我遇到的问题，不是说单纯只是要个结果毕业就好。谢谢你的建议

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12楼2017-03-13 17:20:52
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labglion

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 中洪小刘 at 2017-03-09 17:25:40
您好，有考虑过专业的生物公司提供帮助吗，我这边希望能帮到您！

暂时不是很需要，我希望通过多了解这方面的知识从而发现和解决我遇到的问题，不是说单纯知识要个结果就好了。谢谢你的建议
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13楼2017-03-13 17:22:38
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labglion

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2017-03-09 20:37:00
不是引物的问题，就是模板和酶了，模板重做做，酶用的哪家公司的？
...

模板重新制备过，不知道是不是真的是在提取的过程中有所断裂和降解。然后酶应该没有问题的，因为实验室都在用，包括全式金的EasyTaq以及宝生物的ExTaq。引物方面，将最近合成的引物拿来做梯度以及其他条件的摸索，看看是否能有条带了。问题应该就是出在引物和模板上了
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14楼2017-03-13 17:31:15
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睡神仙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

额。。楼主用oligo dT做引物反转录吗？你确定病毒的RNA上有ployA？
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15楼2018-04-24 21:00:38
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