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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » FISH技术可否用来检测目的基因在生物膜上的分布情况？
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

[求助] FISH技术可否用来检测目的基因在生物膜上的分布情况？ 已有1人参与

如题，我的样本是附着有生物膜的载破片，生物膜是由多种细菌穿插在胞外聚合物中的一种结构，这些目的基因一些是含在胞内，一些是在胞外，我就是通过FISH确定这些目的基因在生物膜上一个分布情况，比如是含在细菌内，还是分布在胞外聚合物上，这个能否通过FISH实现？
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1楼 2017-02-28 14:28:20
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dovekaoyan: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-03-02 20:54:36
先看一下FISH的定义，参照百度百科：
将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。
再来，要考虑你的样品能否做固定，固定后能否结合上目的基因的特异探针。
最后，显微镜下是层面分析，你这个胞内胞外是属于空间分析，如果你有办法做分离，使其在同一个层面上作分析就可以做。
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2楼2017-02-28 18:00:18
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-02-28 18:00:18
先看一下FISH的定义，参照百度百科：
将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛，可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相 ...

固定不是问题，后期观察是不是可以扫描电镜下观察？
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3楼2017-03-03 09:13:17
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bbqlhb

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by dovekaoyan at 2017-03-03 09:13:17
固定不是问题，后期观察是不是可以扫描电镜下观察？...

我没有用过荧光扫描电镜，你可以咨询一下厂家。荧光扫描电镜发出的光谱是否在你所用的荧光激发光光谱里
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4楼2017-03-03 11:38:21
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