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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

[求助] FISH技术可否用来检测目的基因在生物膜上的分布情况? 已有1人参与

如题,我的样本是附着有生物膜的载破片,生物膜是由多种细菌穿插在胞外聚合物中的一种结构,这些目的基因一些是含在胞内,一些是在胞外,我就是通过FISH确定这些目的基因在生物膜上一个分布情况,比如是含在细菌内,还是分布在胞外聚合物上,这个能否通过FISH实现?
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dovekaoyan: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-03-02 20:54:36
先看一下FISH的定义,参照百度百科:
将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。
再来,要考虑你的样品能否做固定,固定后能否结合上目的基因的特异探针。
最后,显微镜下是层面分析,你这个胞内胞外是属于空间分析,如果你有办法做分离,使其在同一个层面上作分析就可以做。
2楼2017-02-28 18:00:18
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dovekaoyan

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2017-02-28 18:00:18
先看一下FISH的定义,参照百度百科:
将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子如生物素、地高辛,可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应,经荧光检测体系在镜下对待测DNA进行定性、定量或相 ...

固定不是问题,后期观察是不是可以扫描电镜下观察?
3楼2017-03-03 09:13:17
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dovekaoyan at 2017-03-03 09:13:17
固定不是问题,后期观察是不是可以扫描电镜下观察?...

我没有用过荧光扫描电镜,你可以咨询一下厂家。荧光扫描电镜发出的光谱是否在你所用的荧光激发光光谱里
4楼2017-03-03 11:38:21
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