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pxw1377513

新虫 (初入文坛)

[交流] realtime方面的问题

我以水稻Cdna为模板,扩增基因GR,以actin为内参。
开始作RT-PCR,摸了几次后发现,actin扩29个循环,GR扩26个循环就能得到较亮的条带。后面做real-time时发现出现了矛盾,通过扩增曲线可以看到,actin在30个循环时达到平台期,同样的模板GR基因到35个循环才达到平台期。
这样得结果是与RT相反的,什么原因我琢磨不透,希望各位能帮帮我

[ Last edited by 350784478 on 2009-10-25 at 15:08 ]
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tomqiao99

木虫 (正式写手)

模板降解?酶活性?
宇宙是由心造的
2楼2008-12-20 13:46:04
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pxw1377513

新虫 (初入文坛)

我重复做了RT,结果还是一样,模板应该没有问题,酶如果有问题,那内参应该循环数应该也会相应的改变呀
3楼2008-12-20 14:55:47
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