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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 关于质粒提取
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白菜蜂蜜

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于质粒提取

各位虫友大家好，我最近用试剂盒提了几次质粒，要么是浓度太低，要么是没有提出来（质粒用来酶切），不知道是什么原因造成的，试剂盒是实验室经常用的应该没什么问题，请各位虫友指点迷津谢谢大家

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1楼 2017-02-21 12:07:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

15910933225

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
让菌液的浓度大一点

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白菜蜂蜜
4楼2017-02-21 18:10:55
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邹忌

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你用的载体是什么载体，是不是低拷贝载体，如果不是可以看看操作过程是否有失误

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不是不能，只是不想
2楼2017-02-21 12:15:52
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胖喵的一生

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
提质粒的时候可以6ml-8ml浓缩到一管
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6楼2017-02-23 09:39:17
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胖喵的一生

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by 白菜蜂蜜 at 2017-02-24 11:21:05
用5ml菌液浓缩了，不过提出来的浓度还是不高
...

摇浓一点吧，我们一般都是摇到OD1.5以上，最后可以少加点水

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11楼2017-02-24 14:46:19
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普通回帖

白菜蜂蜜

新虫 (初入文坛)
载体是酵母的BD载体，已经提了好几次了，操作过程应该不会错

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3楼2017-02-21 15:59:15
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白菜蜂蜜

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 15910933225 at 2017-02-21 18:10:55
让菌液的浓度大一点

好的，我试试看，谢谢你啦

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5楼2017-02-23 09:25:09
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chenshuai1238

金虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-02-25 10:15:58
Elute buffer 用之前70度加热再用，可能是你的plasmid太大，导致elute 不彻底
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7楼2017-02-23 13:40:23
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白菜蜂蜜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by chenshuai1238 at 2017-02-23 13:40:23
Elute buffer 用之前70度加热再用，可能是你的plasmid太大，导致elute 不彻底

已经预热过，如果是质粒太大的话有什么方法可以提高洗脱效率么

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8楼2017-02-24 11:20:05
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白菜蜂蜜

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 胖喵的一生 at 2017-02-23 09:39:17
提质粒的时候可以6ml-8ml浓缩到一管

用5ml菌液浓缩了，不过提出来的浓度还是不高

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9楼2017-02-24 11:21:05
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xinfei20156

新虫 (初入文坛)
菌多摇些时间，最后溶解的时候少加点缓冲液

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10楼2017-02-24 13:19:12
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