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shi6625893金虫 (小有名气)
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三片段的overlap,连接不上为什么 已有3人参与
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各位虫友: 我要做三片段连接,想用overlap来做,但是我用sanpgen软件设计引物,并在snapgen上模拟成功,但是实际做的时候却连不上,我的三个片段长度分别为1500,1300,1300左右,请问为什么,有人做过吗,有什么注意的地方吗? |
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yangxp2006
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overlap方法有时候好使,有时不行,建议用in fusion 同源重组方法融合多个片段,方法简单效率高 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-02-20 21:15:51
jcstone1027
铁杆木虫 (正式写手)
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楼上说的是试剂盒,用试剂盒可能会好些,我觉得你可以分别两段扩增,再拼接全长,直接扩应该是难度很大,并且容易有突变,还有就是做温度剃度,看看怎么样。 发自小木虫IOS客户端 |

3楼2017-02-21 10:07:26
Dandyliujun
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