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shi6625893金虫 (小有名气)
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三片段的overlap，连接不上为什么 已有3人参与
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各位虫友： 我要做三片段连接，想用overlap来做，但是我用sanpgen软件设计引物，并在snapgen上模拟成功，但是实际做的时候却连不上，我的三个片段长度分别为1500,1300,1300左右，请问为什么，有人做过吗，有什么注意的地方吗？ |
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yangxp2006
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overlap方法有时候好使，有时不行，建议用in fusion 同源重组方法融合多个片段，方法简单效率高 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2017-02-20 21:15:51
jcstone1027
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楼上说的是试剂盒，用试剂盒可能会好些，我觉得你可以分别两段扩增，再拼接全长，直接扩应该是难度很大，并且容易有突变，还有就是做温度剃度，看看怎么样。 发自小木虫IOS客户端 |
3楼2017-02-21 10:07:26
Dandyliujun
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4楼2017-02-22 16:50:37