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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞一直在污染，求解答啊
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黄文元1

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞一直在污染，求解答啊 已有6人参与

最近我一直在养MDA细胞，一直污染，而且通常都是传代一次后培养基出现细沙状。一开始以为是培养基污染了，就把培养基换了，把血清也换了。之后发现还是会出现这种状况。
  其次以为是胰酶污染，然后把胰酶也换了。还是不行。
实验台每次都紫外照射至少30min，操作应该没什么大问题，之前都是按照这种操作能养活。。
    现在细胞一直养不活，我想死的心都有了。求大神解答啊

@gyesang 发自小木虫IOS客户端
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1楼 2017-02-16 16:32:37
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黄文元1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-02-16 17:32:02
十有八九是手动移液枪有问题，操作台里外交替使用造成的。

移液枪基本上每次都在台子里照很久。枪头每次用都会灭菌

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3楼2017-02-16 17:37:25
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璧月

捐助贵宾 (正式写手)
有次是我刚驯化好的细胞污染了，同时做的实验12孔板有轻微污染。细胞没冻存，新配培养基（自配）来不及。只能把轻微染菌的母液配好过滤，12孔板上的细胞全部回收，反复用新过滤的培养基离心洗涤，转到T25瓶里培养。万幸，救回来了。

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10楼2017-02-19 19:09:59
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普通回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
十有八九是手动移液枪有问题，操作台里外交替使用造成的。
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2楼2017-02-16 17:32:02
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小刀188

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你这个是支原体污染，可能你养的细胞在冻存的时候已经有支原体污染了，建议你买点支原体清除剂（Nocard  Treatment）处理一下，2-3天即可让你的细胞变过来，同时建议对细胞房及培养箱也杀杀菌，支原体污染会扩散
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4楼2017-02-16 22:08:36
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一叶知秋1987

银虫 (小有名气)
培养箱

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5楼2017-02-17 10:58:29
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hahoo7360

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议对你培养所用的培养基，血清，胰酶，PBS等进行孔板培养，以排查是哪种液体污染，如果没有的话对操作台和培养箱都进行无菌测试。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

黄文元1
6楼2017-02-17 13:09:14
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黄文元1

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by hahoo7360 at 2017-02-17 13:09:14
建议对你培养所用的培养基，血清，胰酶，PBS等进行孔板培养，以排查是哪种液体污染，如果没有的话对操作台和培养箱都进行无菌测试。

孔板筛选怎么做啊

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7楼2017-02-17 13:39:00
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黄文元1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 一叶知秋1987 at 2017-02-17 10:58:29
培养箱

培养箱已经紫外照了

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8楼2017-02-18 11:24:45
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bangtree

禁虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
9楼2017-02-18 11:43:45
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