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黄文元1

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞一直在污染,求解答啊 已有6人参与

最近我一直在养MDA细胞,一直污染,而且通常都是传代一次后培养基出现细沙状。一开始以为是培养基污染了,就把培养基换了,把血清也换了。之后发现还是会出现这种状况。
  其次以为是胰酶污染,然后把胰酶也换了。还是不行。
实验台每次都紫外照射至少30min,操作应该没什么大问题,之前都是按照这种操作能养活。。
    现在细胞一直养不活,我想死的心都有了。求大神解答啊

@gyesang 发自小木虫IOS客户端
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黄文元1

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2017-02-16 17:32:02
十有八九是手动移液枪有问题,操作台里外交替使用造成的。

移液枪基本上每次都在台子里照很久。枪头每次用都会灭菌

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3楼2017-02-16 17:37:25
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璧月

捐助贵宾 (正式写手)

有次是我刚驯化好的细胞污染了,同时做的实验12孔板有轻微污染。细胞没冻存,新配培养基(自配)来不及。只能把轻微染菌的母液配好过滤,12孔板上的细胞全部回收,反复用新过滤的培养基离心洗涤,转到T25瓶里培养。万幸,救回来了。

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10楼2017-02-19 19:09:59
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普通回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
十有八九是手动移液枪有问题,操作台里外交替使用造成的。
2楼2017-02-16 17:32:02
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小刀188

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个是支原体污染,可能你养的细胞在冻存的时候已经有支原体污染了,建议你买点支原体清除剂(Nocard  Treatment)处理一下,2-3天即可让你的细胞变过来,同时建议对细胞房及培养箱也杀杀菌,支原体污染会扩散
4楼2017-02-16 22:08:36
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一叶知秋1987

银虫 (小有名气)

5楼2017-02-17 10:58:29
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hahoo7360

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议对你培养所用的培养基,血清,胰酶,PBS等进行孔板培养,以排查是哪种液体污染,如果没有的话对操作台和培养箱都进行无菌测试。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2017-02-17 13:09:14
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黄文元1

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by hahoo7360 at 2017-02-17 13:09:14
建议对你培养所用的培养基,血清,胰酶,PBS等进行孔板培养,以排查是哪种液体污染,如果没有的话对操作台和培养箱都进行无菌测试。

孔板筛选怎么做啊

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7楼2017-02-17 13:39:00
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黄文元1

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一叶知秋1987 at 2017-02-17 10:58:29
培养箱

培养箱已经紫外照了

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8楼2017-02-18 11:24:45
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bangtree

禁虫 (初入文坛)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

9楼2017-02-18 11:43:45
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