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matureboy

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 求助

我是做蛋白分离的，粗蛋白过弱阴离子交换层析时挂柱，pH8.0,磷酸盐缓冲液，用梯度洗脱感觉分不大开，效果不是很明显，想求助各位大侠，
（1）有什么好的办法可以解决
（2）还有没有别比DEAE更弱的填料
先谢谢了！！
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1楼 2008-12-17 18:57:47
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lzx08

★ ★ ★ ★ ★ ★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢参与讨论~
matureboy(金币+1,VIP+0):谢谢
matureboy(金币+4,VIP+0): 7-4 08:31
离子交换层析属于中度纯化，可以通过凝胶过滤层析再细化。选择更好的样品处理方法以减少干扰成分，选择合适的上样量，在线性洗脱下，再提升或降低pH你的缓冲液pH试试看。
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3楼2008-12-17 23:46:15
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★
matureboy(金币+2,VIP+0):谢谢指教
matureboy(金币+3,VIP+0): 7-4 08:30
(1)蛋白纯化只有一个方法一个方法试
(2)弱阴离子交换层析并不是指蛋白与填料的结合力弱,而是指该填料的工作pH范围窄
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2楼2008-12-17 19:37:31
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