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[求助]
有做两栖类胚胎的吗？小妹想求助一下~ 已有1人参与
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想问一下，怎样很好的固定青蛙的胚胎？将来要做切片，多聚甲醛可以吗？还有甲醇怎样固定呀，求大神指教。 @gyesang 发自小木虫Android客户端 |
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youyudeyu123
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 677
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- 在线: 52.4小时
- 虫号: 937773
- 注册: 2010-01-06
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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组织固定于4%多聚甲醛24 h后取出修整使切面平整，置入梯度酒精脱水、浸蜡包埋。具体脱水和浸蜡包埋步骤如下： （1）75%酒精中脱水4h； （2）85%酒精中脱水2-4 h； （3）90%酒精中脱水1-2 h； （4）95%酒精中脱水1 h； （5）100%酒精Ⅰ中脱水30 min-1h； （6）100%酒精Ⅱ中脱水30 min-1h； （7）无水乙醇二甲苯中透明5-10min； （8）二甲苯Ⅰ中透明5-10min； （9）二甲苯Ⅱ中透明5-10min（观察透明效果）； （10）石蜡Ⅰ中浸蜡1h； （11）石蜡Ⅱ中浸蜡1h； （12）石蜡Ⅲ中浸蜡1h （13）包埋机包埋，修蜡块。 将修整好的蜡块置于石蜡切片机上连续切片，片厚4μm。 将切片漂浮于45℃ 温水表面展平，然后用防脱处理过的载玻片捞起，并放进60℃ 烘箱内烘烤，最后将烘好的切片室温保存备用。 |
2楼2017-02-16 08:15:39