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舒写青春

新虫 (初入文坛)

[求助] 有做两栖类胚胎的吗?小妹想求助一下~ 已有1人参与

想问一下,怎样很好的固定青蛙的胚胎?将来要做切片,多聚甲醛可以吗?还有甲醇怎样固定呀,求大神指教。

@gyesang 发自小木虫Android客户端
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youyudeyu123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
组织固定于4%多聚甲醛24 h后取出修整使切面平整,置入梯度酒精脱水、浸蜡包埋。具体脱水和浸蜡包埋步骤如下:
(1)75%酒精中脱水4h;
(2)85%酒精中脱水2-4 h;
(3)90%酒精中脱水1-2 h;
(4)95%酒精中脱水1 h;
(5)100%酒精Ⅰ中脱水30 min-1h;
(6)100%酒精Ⅱ中脱水30 min-1h;
(7)无水乙醇二甲苯中透明5-10min;
(8)二甲苯Ⅰ中透明5-10min;
(9)二甲苯Ⅱ中透明5-10min(观察透明效果);
(10)石蜡Ⅰ中浸蜡1h;
(11)石蜡Ⅱ中浸蜡1h;
(12)石蜡Ⅲ中浸蜡1h
(13)包埋机包埋,修蜡块。
将修整好的蜡块置于石蜡切片机上连续切片,片厚4μm。 将切片漂浮于45℃ 温水表面展平,然后用防脱处理过的载玻片捞起,并放进60℃ 烘箱内烘烤,最后将烘好的切片室温保存备用。
加油
2楼2017-02-16 08:15:39
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