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781055707

木虫 (著名写手)

[求助] 如果正向引物和目的片段正义链互补,反向引物与目的片段正义链相同,PCR能扩出来吗?

PCR本来正向引物和目的片段正义链相同,反向引物与目的片段正义链互补。
现在我把,正向引物和目的片段正义链互补,反向引物与目的片段正义链相同,请问PCR能扩出来吗。
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采菊东篱下,悠然见南山。
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
781055707: 金币+5, 有帮助 2017-02-14 11:10:01
关键是看看方向对不对,2条引物的3’端要相向。
2楼2017-02-13 08:57:05
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lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2017-02-13 23:02:55
781055707: 金币+5 2017-02-14 11:10:12
额。。。不知道我理解的对不对。。
什么正向引物反向引物都是认为明明的,其实复制过程就是两个引物和两条链互补,我觉得楼主的情况是没有印象的。
一定要说的话, 楼主第二段中“现在我把……”只是命名反了。因为正向引物反向引物本来是没有实际意义的,它的定义就是根据与谁互补来命名的。
根据自己并不完善的知识,纯手打。仅供参考。
诸事顺遂
3楼2017-02-13 10:12:14
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莫等闲111

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主优秀版主

其实复制过程就是两个引物和两条链互补,3端一条引物,5端一条引物,所谓的正义链,反义链,正向引物,反向引物都是人物规定的,是相对概念,并不是绝对的。两条引物的目的是为了什么,这点你要搞清楚,我认为两条引物是为了复制出你要的目的片段,所谓两点确定一条线段,只要保证两条引物的分别与模板链互补,而不是在都与一条模板链互补 (这样相当于设计了一条引物)。
给你来张图:http://muchong.com/bbs/post.php?action=reply&fid=366&tid=11039906
如果正向引物和目的片段正义链互补,反向引物与目的片段正义链相同,PCR能扩出来吗?
QQ图片20170214120107.jpg

站内信:http:///muchong.com/bbs/box.php评分及查找应助者发送的密码http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7465070&fpage=1
10楼2017-02-14 12:02:17
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普通回帖

lialee22

木虫 (著名写手)

黑钻会员

【答案】应助回帖

额。。。不知道我理解的对不对。。
什么正向引物反向引物都是人为命名的,其实复制过程就是两个引物和两条链互补,我觉得楼主的情况是没有影响的。
一定要说的话, 楼主第二段中“现在我把……”只是命名反了。因为正向引物反向引物本来是没有实际意义的,它的定义就是根据与谁互补来命名的。
根据自己并不完善的知识,纯手打。仅供参考。
(上一条好多错别字……)
诸事顺遂
4楼2017-02-13 10:15:10
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5楼2017-02-13 11:00:15
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drwhoknowss

荣誉版主 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
781055707: 金币+1 2017-02-15 11:49:08
不能。DNA都是5-3'的,你现在相当于箭头反向向外指。不能形成双链

发自小木虫IOS客户端
Progress in science depends on new techniques, new discoveries and new ideas, probably in that order. -- Nobel laureate Sydney Brenner
6楼2017-02-13 11:00:15
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莫等闲111

版主 (知名作家)

优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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781055707: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-02-14 11:16:45
可以的,自己可以画个图,正义链这个叫法可以不考虑,对你的pcr没有影响,所以假设下面一条链为正义链。如图所示,是可以进行pcr的。http://muchongimg.xmcimg.com/dat ... _1486992665_637.png
如果正向引物和目的片段正义链互补,反向引物与目的片段正义链相同,PCR能扩出来吗?-1
捕获.PNG

站内信:http:///muchong.com/bbs/box.php评分及查找应助者发送的密码http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7465070&fpage=1
7楼2017-02-13 21:33:27
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781055707

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 莫等闲111 at 2017-02-13 21:33:27
可以的,自己可以画个图,正义链这个叫法可以不考虑,对你的pcr没有影响,所以假设下面一条链为正义链。如图所示,是可以进行pcr的。http://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2017/0213/w167h4086716_1486992665_637 ...

正义链
5——————————————————3
5—————3
正向引物



               反义链
3——————————————————5
                                  3——————5
                                   反向引物
采菊东篱下,悠然见南山。
8楼2017-02-14 11:28:33
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781055707

木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 莫等闲111 at 2017-02-13 21:33:27
可以的,自己可以画个图,正义链这个叫法可以不考虑,对你的pcr没有影响,所以假设下面一条链为正义链。如图所示,是可以进行pcr的。http://muchongimg.xmcimg.com/data/bcs/2017/0213/w167h4086716_1486992665_637 ...

你好,那我引物如果是这样的话还能P出来吗
采菊东篱下,悠然见南山。
9楼2017-02-14 11:29:52
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