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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 金币求助DNA分离提纯，麻烦斑竹发金币，谢谢！
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wyong186

木虫 (正式写手)

[交流] 金币求助DNA分离提纯，麻烦斑竹发金币，谢谢！

请教大家一个问题, 我的实验过程：①总DNA提取 →PCR →DNA提纯分离 →目的DNA片段； 然后为了获得浓度较大的DNA② 以目的DNA片段为模板进行PCR，检测时为什么会出现拖尾？

[ Last edited by wyong186 on 2008-12-17 at 08:57 ]
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1楼 2008-12-16 20:35:47
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charon1982

铁杆木虫 (著名写手)
smear 的原因：1，胶 梳子拔得太早过晚，上样空不平；2，上样、电泳buffer变质，且越跑越模糊3，PCR产物本身：非特异条带太多，酶量太大，循环数太多，模板质量不好，有蛋白等污染，镁离子过多4，PCR本身就是SMEAR,如mRNA
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帮助虫友，提升自己
5楼2008-12-17 10:15:58
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
可以适当提高温度
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2楼2008-12-16 23:01:27
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
PCR的模板量太大
提高退火温度
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3楼2008-12-17 08:37:57
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