应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 如何鉴别DNA提取磁珠
411/1返回列表
查看: 3347  |  回复: 40
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

rhapsody007

金虫 (小有名气)

[交流] 如何鉴别DNA提取磁珠

1、磁珠的结构
      生物磁珠的种类是多种多样的，磁珠为核壳结构，中心为氧化铁内核，中层包裹封闭基质，外层修饰官能团。中层基质不同，磁珠的基本性质会有所不同；修饰的官能团不同，磁珠的吸附特性会有所不同。即便是相同的封闭基质和官能团，基质的包被工艺不同，会造成基质厚度、孔容、孔径、比表面积不同，所能吸附的颗粒粒径偏好也会有所不同；即便是修饰相同的官能团，官能团修饰工艺不同，会造成官能团密度、臂长不同，所携带的表面电荷、斥力、氢键数量不同，吸附能力会随之改变。
      由此可见，磁珠的种类是多种多样的，制作过程中一点微小的变化，都会制出完全不同的磁珠。而不同的磁珠基本特性不同，用于实验中吸附和释放吸附物的条件也完全不同，所以不同磁珠适用的领域也有所区别。
2、DNA提取磁珠的重要参数
2.1、DNA提取磁珠的悬浮性
      因为磁珠虽然具有一定的流动性，能够均匀分散在液体中，跟随液相进入实验体系，但磁珠毕竟还是固体，会在液体中以一定速度沉降。所以磁珠的半沉降时间应在3min以上，才能保证磁珠在混匀后到加入样本中的过程中不因为沉降过快而导致加入量不准确，如果是高通量的实验，对磁珠的半沉降时间要求会更高。良好的悬浮性，在实验过程中不用频繁混匀磁珠，方便快捷的同时增加了实验的稳定性和均一性。
2.2、DNA提取磁珠的磁吸时间
      磁珠携带目的DNA与体系中杂质分离的过程，主要是通过外加磁场使磁珠定向移动并达到固液分离的目的，所以磁珠的磁吸时间会影响固液分离的时间时间。目前市面上的磁珠磁吸时间在5s--60s不等，这个区间比较适合手动或仪器操作，过长的磁吸时间会降低实验效率。
2.3、DNA提取磁珠的比表面积
      部分使用磁珠的实验人员认为粒径越小的磁珠比表面积越大吸附效果也越好，这种想法并不完全正确。因为磁珠表面并不是光滑平整的球面，而是在中间基质层有孔洞，外围修饰集团有凸起的，比表面积并不由粒径大小决定，而且也并不是比表面积越大吸附效果就越好的。提取DNA的过程是磁珠与各种试剂的配合使用，只有整体效果稳定，提取结果才会更可靠。
2.4、DNA提取磁珠的官能基团
      一般认为磁珠表面官能团能越密集，对核酸的吸附效果越好，但考虑到空间位阻、电荷斥力，过高浓度使官能团陷入磁珠内部等原因，DNA提取磁珠的表面官能团数量并不是无限制越多越好的。适当的降低磁珠生产过程中官能团修饰原料，可以很好的控制DNA提取磁珠的粒径和吸附量平衡。
      除了磁珠本身的性质之外，提取纯化DNA的过程中，使用的试剂体系也要和磁珠相匹配，能够提取DNA的磁珠种类很多样，不仅包被的中层基质可能不同，表面修饰的官能团也并不尽相同，不同磁珠适用的试剂体系是有区别的，吸附原理也不同，需要使用者根据具体情况进行不同的调整和测试。
      面对不同的磁珠产品，选择标准的DNA提取磁珠生产厂家，是效率最高的方法。
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

zx0187

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2017-02-10 12:41:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杜一无二

银虫 (小有名气)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
看完了，楼上很认真，细心。
赞一下 回复此楼
11楼2017-02-10 13:24:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

D的小酒窝

金虫 (小有名气)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
牛 如果提取试剂盒过期的话 是不是颜色是什么样的 另外对提前dna或rna有区别的么

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
23楼2017-02-10 15:33:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhapsody007

金虫 (小有名气)
引用回帖:
23楼: Originally posted by D的小酒窝 at 2017-02-10 15:33:20
牛 如果提取试剂盒过期的话 是不是颜色是什么样的 另外对提前dna或rna有区别的么

1、提取试剂盒过期的话，个人认为磁珠过期的可能不大，磁珠一般能放18个月，甚至更长，一般裂解液过期的可能性较大，提取过程中，颜色应该会比以前深
2、目前磁珠这块应该没有细分到DNA或RNA专用，重点在试剂上做一些优化
赞一下 回复此楼
24楼2017-02-10 15:40:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

D的小酒窝

金虫 (小有名气)
台湾圆点试剂盒 就好像分dna和rna的 从原理上有没有什么本质区别

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
25楼2017-02-10 16:16:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rhapsody007

金虫 (小有名气)
引用回帖:
25楼: Originally posted by D的小酒窝 at 2017-02-10 16:16:27
台湾圆点试剂盒 就好像分dna和rna的 从原理上有没有什么本质区别

是的，试剂盒的话，是要区分DNA、RNA的，不过磁珠应该区别不大，或许能通用（个人猜测~），我们用的是吉恩特的，做DNA做的多一些
赞一下 回复此楼
26楼2017-02-10 16:30:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

D的小酒窝

金虫 (小有名气)
我一般做的rna病毒多一些 前一段时间用圆点试剂盒rna的提取了dna腺病毒的 不知道会不会有什么影响 以前我们手工用的是德国凯杰

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
27楼2017-02-10 17:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bobcanada

至尊木虫 (文坛精英)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
ding
回复此楼
31楼2017-02-13 00:26:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
silicare: 屏蔽内容, 违规存档 2017-02-20 10:32:41
本帖内容被屏蔽
33楼2017-02-13 09:51:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

咖屲戈

新虫 (小有名气)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
选择品牌知名度高的厂家可靠些，差别不是太大

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
34楼2017-02-13 09:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sjm042

新虫 (小有名气)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
学习学习

发自小木虫Android客户端
回复此楼
36楼2017-02-25 19:09:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶∏_∏

新虫 (小有名气)
★
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
第一次听到磁珠这个词

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
37楼2017-02-25 21:18:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zx0187

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
你好，可以请问一下磁珠的沉降时间和磁吸时间是由什么因素决定的吗？
赞一下 回复此楼
39楼2018-08-07 13:06:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

igfw

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
现在磁珠有国产的么

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
41楼2018-08-21 20:17:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
zhchzhsh20762楼
2017-02-10 12:51   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福祝福
syhorchid3楼
2017-02-10 12:55   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
foxs24楼
2017-02-10 12:58   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
祝福
dsctg5楼
2017-02-10 12:59   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
王惠6楼
2017-02-10 13:01   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
m 发自小木虫IOS客户端
nono20097楼
2017-02-10 13:13   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
·
2852465368楼
2017-02-10 13:20   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
laom20139楼
2017-02-10 13:21   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
超级老快10楼
2017-02-10 13:22   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
hydzp12楼
2017-02-10 13:37   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
shenrenren13楼
2017-02-10 13:40   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
wtbccq50514楼
2017-02-10 13:45   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
slytjiaofei15楼
2017-02-10 13:48   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
miaojiabing16楼
2017-02-10 13:49   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
朝都17楼
2017-02-10 13:56   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
好 发自小木虫Android客户端
xhmaohan18楼
2017-02-10 14:02   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
天涯201219楼
2017-02-10 14:03   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
纳米材料75320楼
2017-02-10 14:12   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
tzynew21楼
2017-02-10 14:16   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
ajingne122楼
2017-02-10 14:40   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
发自小木虫Android客户端
tan91428楼
2017-02-11 00:28   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
caoquanrang29楼
2017-02-11 09:10   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
假大空30楼
2017-02-11 09:25   回复  
rhapsody007(金币+1): 谢谢参与
顶
hydzp32楼
2017-02-13 08:44   回复  
nono200935楼
2017-02-18 21:15   回复  
·
查找文献38楼
2017-03-24 17:15   回复  
blink92040楼
2018-08-10 13:48   回复  
相关版块跳转 我要订阅楼主 rhapsody007 的主题更新
411/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 18/900 2026-08-24 12:03 by iaeyuan
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭