| 查看: 987 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：怎么选择透析袋
|
|||
|
我想把分子量五百多的投过去，而分子量三千六的DNA引物不投过去，该选择什么样规格的透析袋阿？ [ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 21:14 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有24人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有70人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
-
招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师
已经有3人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有23人回复
-
filecode=后面第一个是大写字母
已经有7人回复
-
filecode
已经有12人回复
-
小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊
已经有13人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有7人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有13人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
nonfouling
木虫 (正式写手)
- 应助: 23 (小学生)
- 金币: 2547.2
- 散金: 36
- 红花: 2
- 帖子: 867
- 在线: 242小时
- 虫号: 516529
- 注册: 2008-03-02
- 性别: GG
- 专业: 胶体与界面化学
6楼2009-06-28 15:57:24
cauzhangtao
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 4297.5
- 散金: 13
- 红花: 3
- 帖子: 699
- 在线: 130小时
- 虫号: 547332
- 注册: 2008-04-17
- 性别: GG
- 专业: 分子与进化生态学
★ ★ ★
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢分享~
amisking(金币+2,VIP+0):幸苦！ 6-28 16:04
lwf991229(金币+1,VIP+0):感谢分享~
amisking(金币+2,VIP+0):幸苦！ 6-28 16:04
|
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，就叫做透析袋。 自Thomas Graham 1861年发明透析方法至今已有一百多年。透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。 透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。 透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。 透析膜可用动物膜和玻璃纸等，但用的最多的还是用纤维素制成的透析膜，目前常用的是美国Union Carbide （联合碳化物公司）和美国光谱医学公司生产的各种尺寸的透析管，截留分子量MwCO（即留在透析袋内的生物大分子的最小分子量，缩写为MwCO）通常为1 万左右。 商品透析袋制成管状，其扁平宽度为23 mm～50 mm不等。为防干裂，出厂时都用10％的甘油处理过，并含有极微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其它生物活性物质有害，用前必须除去。可先用50％乙醇煮沸1小时，再依次用50％乙醇、0.01 mol/L碳酸氢钠和0.001 mol/L EDTA溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。实验证明，50％乙醇处理对除去具有紫外吸收的杂质特别有效。使用后的透析袋洗净后可存于4℃蒸馏水中，若长时间不用，可加少量NaN2，以防长菌。洗净凉干的透析袋弯折时易裂口，用时必须仔细检查，不漏时方可重复使用。 新透析袋如不作如上的特殊处理，则可用沸水煮五至十分钟，再用蒸馏水洗净，即可使用。使用时，一端用橡皮筋或线绳扎紧，也可以使用特制的透析袋夹夹紧，由另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。含盐量很高的蛋白质溶液透析过夜时，体积增加50％是正常的。为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用磁子搅拌。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。小量体积溶液的透析，可在袋内放一截两头烧园的玻璃棒或两端封口的玻璃管，以使透析袋沉入液面以下。 检查透析效果的方法是：用1％ BaCl2检查(NH4)2SO4，用1％ AgNO3 检查NaCl、KCl等。 为了提高透析效率，还可以使用各种透析装置。使用者也可以自行设计与制作各种简易的透析装置。美国生物医学公司（Biomed Instruments Inc.）生产的各种型号的Zeineh 透析器，由于使用对流透析的原理，使透析速度和效率大大提高。 根据个人使用经验，建议使用透析袋效果比较好，还有具体需要什么规格的要看你的目的蛋白量有多大，才能决定使用多大的截留分子量的透析袋，一般截留量越大价格也就会越高，还有就是透析袋宽度的选择，要看你的实验一次需要透析多少量来决定。目前我的实验室使用的是上海生工的透析袋，宽度70mm 普通型的！ |
2楼2008-12-17 13:33:23
xiaoyuan622
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 674.9
- 散金: 141
- 帖子: 103
- 在线: 7.8小时
- 虫号: 449952
- 注册: 2007-11-03
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2008-12-17 15:59:29
4楼2008-12-18 14:44:05
