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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 营养安全 » 我的RAW264.7细胞怎么都养不活。。
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迦木

新虫 (小有名气)

[求助] 我的RAW264.7细胞怎么都养不活。。 已有2人参与

我养了3个星期的RAW264.7细胞，细胞传代时间把握不好，细胞总是形状不规则。我该怎么办？

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1楼 2017-01-07 22:26:08
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
学习一项技术都是有个艰难的过程，我家孩子也经历这一过程，我让她记录细胞不活的过程，然后与师姐和导师讨论，这样做也可能是一新发现的机会。你要坚持一定能成功。你的细胞不成活的原因是消毒不够彻底，或没有定时喂养饿死了。

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从事科研工作数载，现已退休，有一些经验可以奉献给年轻人，但电脑水平不佳，还需学习。
2楼2017-01-08 07:59:33
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迦木

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-01-08 07:59:33
学习一项技术都是有个艰难的过程，我家孩子也经历这一过程，我让她记录细胞不活的过程，然后与师姐和导师讨论，这样做也可能是一新发现的机会。你要坚持一定能成功。你的细胞不成活的原因是消毒不够彻底，或没有定时 ...

谢谢您的回复，我每次都是因为污染。但是污染的原因都不同。我该怎么办？

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3楼2017-01-08 11:02:18
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 迦木 at 2017-01-08 11:02:18
谢谢您的回复，我每次都是因为污染。但是污染的原因都不同。我该怎么办？
...

每一步都认真去做，不要怕麻烦，消毒的过程做的要彻底。

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从事科研工作数载，现已退休，有一些经验可以奉献给年轻人，但电脑水平不佳，还需学习。
4楼2017-01-08 14:05:10
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w911227

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
都是因为污染造成的？是不是培养箱里面的滤膜该换了？如果滤膜脏了或者坏掉的话细胞是非常容易污染的。如果不是污染的问题，换一下血清试试。我之前也是养了好久细胞一直长不好一直找不到原因，后来找培养箱的工程师过来对整个系统重新校准了一遍就好了。但你这不一定是培养环境的问题，可能是血清质量不行，确定是不是有黑胶虫污染。
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
5楼2017-01-08 16:16:00
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niekun0557031
顶

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6楼2017-01-08 17:10:38
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迦木

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by w911227 at 2017-01-08 16:16:00
都是因为污染造成的？是不是培养箱里面的滤膜该换了？如果滤膜脏了或者坏掉的话细胞是非常容易污染的。如果不是污染的问题，换一下血清试试。我之前也是养了好久细胞一直长不好一直找不到原因，后来找培养箱的工程师 ...

如何判断黑胶虫？

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7楼2017-01-08 23:25:34
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w911227

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 迦木 at 2017-01-08 23:25:34
如何判断黑胶虫？
...

黑胶虫污染的表现：
1. 细胞生长速度减慢，严重时甚至停止生长。
2. 细胞有向间质细胞形态转变的倾向，细胞突起增多，甚至伸出长的类似神经轴突样触角，或细胞梭形改变。
3. 除部分细胞出现上述形态改变外，其余大部分细胞面积变大（注意不是体积），立体感变差，细胞排列疏松，胞核距离增大（注意不是细胞间距离），边缘呈皱褶样，感觉整个细胞变扁软瘫在培养瓶底。
4. 仔细观察，形态出现间质细胞转变的细胞似乎对致病因素的耐受性更强，体积变大的细胞死亡比例更高，继续培养大部分细胞变成多突起或梭形细胞。
5. 细胞对各种处理因素的敏感性增强，细胞容易死亡，平板克隆形成实验在空白组的克隆形成率大约只有正常的1/3—1/2，而且克隆小，松散。
6. 400倍显微镜下观察，细胞胞浆内可见多个折光性强的颗粒，类圆形或短杆样，部分融合成团，细胞周围也可见数个类似的颗粒呈类似布朗运动的扭动。
7. 连续传代，可筛选出部分耐受性较强的细胞，形态相对正常，增殖速度相对正常，但仍不稳定，可能于某次传代后细胞形态再次改变。
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苦难的日子终将逝去，但强者却永存
8楼2017-01-09 19:18:39
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