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我是大婵子

新虫 (初入文坛)

[求助] 单链DNA如何从金表面脱离? 已有3人参与

我在胶体金表面通过金硫键连了单链DNA,现在想把DNA从金表面弄下来该怎么做?DTT使用时有什么注意事项吗?温度时间之类的?
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2573969629

新虫 (正式写手)

不太好做吧

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2017-01-05 18:06:56
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电分析化学

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
金硫键不耐高温,一般不能高于60度,你可以尝试高温处理,高温离心或过滤,确保键断开后,DNA与纳米金分离,不然温度降下来后,可能又会重新生成金硫键。没尝试过,你可以试试。强碱性条件也可以,高温可能较温和一点

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

3楼2017-01-05 20:11:46
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我是大婵子

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 电分析化学 at 2017-01-05 20:11:46
金硫键不耐高温,一般不能高于60度,你可以尝试高温处理,高温离心或过滤,确保键断开后,DNA与纳米金分离,不然温度降下来后,可能又会重新生成金硫键。没尝试过,你可以试试。强碱性条件也可以,高温可能较温和一 ...

谢谢,我看文献里是用DTT,打算先增加DTT浓度试试

发自小木虫Android客户端
4楼2017-01-15 13:44:50
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chenj-315

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以加入GSH水解金硫键
5楼2017-03-26 08:35:28
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君亲临天下

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

刚好今天看到两个
1, DTT和纳米金表面DNA的替换反应
   加入配制好的DTT 溶液(最终浓度为12mmol·L-1)和600μL Tris-HCl缓冲溶液,室温反应20h,磁分离后,在激发波长为470nm的条件下,记录500~550nm 范围内清液的荧光强度。
来源   牛淑妍等:纳米金放大法荧光检测乙肝病毒HBV-DNA

2,Liberationofattachedoligonucleotidereportersfrom the AuNPwasaccomplishedthroughdithiothreitol(DTT)exchange.
MMP-probe/DNA/probe-AuNPsampleswereresuspendedin100 mL of 5MDTTandheatedto95 1C for15min.Sampleswerethen
incubated at21 1C underagitationandprotectionfromlightfor 45 min.HeatandDTTpromotedexchangeoftheAuNPforDTTon
the AuNPsurface.Sampleswerecentrifugedat13,000g for 30min to pellettheMMPandAuNPs,leavingallDNAspeciesinsolution.
来源  M.J. Andersonetal./BiosensorsandBioelectronics42(2013)581–585
我是直接复制粘贴的,中间间隔有点问题
6楼2017-06-05 22:38:49
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溜溜的小学生

银虫 (小有名气)

我最近也在做一直断不开,请问你最后断开了吗?

发自小木虫Android客户端
7楼2018-08-05 22:04:09
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