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小虫虫fly

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白脱盐，求大神帮忙 已有1人参与

复性完的蛋白进行脱盐，蛋白分子量70KD左右，浓度0.01-0.05mg/ml，十几ml的量，透析和超滤应该用哪种方法比较好呢，哪种方法损失较少，求大神帮忙@wizardfan@飞约疯人院
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1楼 2017-01-05 15:37:01
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若水空杯

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小虫虫fly: 金币+10, ★★★很有帮助 2017-01-06 14:01:13
都可以，个人认为还是再做一次透析比较好，毕竟比较温和，而且体积变化不大，如果做超滤的话要分几管做。另外如果有脱盐柱的话，直接置换buffer最好
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每一个不曾起舞的日子，都是对生命的辜负！
2楼2017-01-05 16:47:48
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ipodman

铁虫 (初入文坛)
超滤损失的多
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3楼2017-01-06 12:32:26
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小虫虫fly

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 若水空杯 at 2017-01-05 16:47:48
都可以，个人认为还是再做一次透析比较好，毕竟比较温和，而且体积变化不大，如果做超滤的话要分几管做。另外如果有脱盐柱的话，直接置换buffer最好

可是不是说脱盐柱会损失更多吗，本来蛋白量就不多，比较担心
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4楼2017-01-06 13:58:02
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若水空杯

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小虫虫fly at 2017-01-06 13:58:02
可是不是说脱盐柱会损失更多吗，本来蛋白量就不多，比较担心...

不会啊，因为脱盐柱本身就是个分子筛不吸附蛋白，怎么会损失呢？只是体积可能会增大，最后再做个超滤浓缩就行，当然也和你买的脱盐柱的质量有关……
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每一个不曾起舞的日子，都是对生命的辜负！
5楼2017-01-09 10:41:59
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芜湖胡俊

新虫 (初入文坛)
大分子透析几次，浓度下降，不过没关系，可以冻干

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6楼2017-01-09 12:42:02
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