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羽翼N1

铜虫 (初入文坛)

[求助] 抑制剂处理细胞时间及方法

在研究信号通路时通常使用到各种激酶的抑制剂,文献里都是pretreat cell X min 或X h,提前处理细胞30分钟之类的,请问30分钟之后再给药时更换的培养基里还含不含有抑制剂?如果不含,仅处理30min能保证之后的24h或48h目标分子都是处于被抑制状态吗?如何还含有抑制剂为什么要提前处理,不能跟研究的药物一起加吗?
        我实验尝试过文献里的抑制剂浓度处理细胞24h以上,加入有些抑制剂比如LY294002时细胞大量细胞,而又些抑制剂细胞活力不受影响。所以抑制剂到底该怎么使用,看了一堆文献全是pretreat,困惑好久,希望得到帮助,万分感谢!
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