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橙子不小

新虫 (初入文坛)

[求助] 新人求助,PCR扩增不出目的片段已有1人参与

为什么会拖下来一大段,什么片段都没有呢?目的片段500bp左右,高GC,之前扩的几次虽然也拖但还是有模糊的片段…之前几次加了dmso以减少非特异性扩增,这次忘了加,会是这个原因吗?

新人求助,PCR扩增不出目的片段


@biostar2009 发自小木虫IOS客户端
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橙子不小

新虫 (初入文坛)

2楼2017-01-03 15:06:03
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y383514131

银虫 (小有名气)

此事说来终觉浅,莫问出处便是真
3楼2017-01-03 18:03:24
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轩云飞

新虫 (初入文坛)

4楼2017-01-03 20:25:53
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橙子不小

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by y383514131 at 2017-01-03 18:03:24
搞个剃度退火

是退火温度的原因吗

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-01-04 09:03:55
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小静儿000

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果你的GC含量大于60%,建议你在扩增的时候加PCR enhancer,或者你可以用诺唯赞的一款扩高GC的高保真酶Phanta Max,然后结合你的DMSO进行扩增,基本就没什么问题了。
6楼2017-01-04 09:34:56
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橙子不小

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小静儿000 at 2017-01-04 09:34:56
如果你的GC含量大于60%,建议你在扩增的时候加PCR enhancer,或者你可以用诺唯赞的一款扩高GC的高保真酶Phanta Max,然后结合你的DMSO进行扩增,基本就没什么问题了。

非常感谢!

发自小木虫IOS客户端
7楼2017-01-04 11:45:30
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xiaoluo102

银虫 (初入文坛)

没有后路 只有出路
8楼2017-12-30 10:07:10
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强仔123

新虫 (小有名气)

9楼2018-04-08 23:30:23
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