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11哈哈

新虫 (初入文坛)

[求助] 阴离子交换树脂碱性缓冲溶液的选择,请大神指教 已有4人参与

最近做蛋白质的纯化,用的阴离子交换树脂,发现ph7.5和8.5都不能使我的目标蛋白洗脱下来,请大神推荐一下,ph9.5-11.5的缓冲溶液,非常感谢
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hg30717580

木虫 (职业作家)

总经理

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个树脂的选择有误把 另外我觉得你的目的不明确
突破自我,喜迎曙光
2楼2017-01-03 09:52:20
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hldj1964

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pH9.5硼酸缓冲液
我可以告诉你0、2ML硼酸缓冲液的配制方法
A液: 硼酸 1、2368g B液:硼酸钠(硼砂)1、907g
氯化钠 0、2925g 加蒸馏水 100ml
加蒸馏水到100ml
配PH9、5
取B 液10ml 既可
PH9、11取A 液1、0ml B液9、0ml
从事科研工作数载,现已退休,有一些经验可以奉献给年轻人,但电脑水平不佳,还需学习。
3楼2017-01-03 12:18:58
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weiwokaoyan

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白洗脱所选用的缓冲液不只是和pH有关吧,你试试不同浓度梯度的缓冲溶液
4楼2017-01-03 16:57:31
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11哈哈

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hg30717580 at 2017-01-03 09:52:20
你这个树脂的选择有误把 另外我觉得你的目的不明确

不好意思,是我的问题没有表达好,我用ph7.5和8.5的缓冲溶液不能使我的目标蛋白挂在柱子上,所以想选择更高ph值得缓冲溶液试试
5楼2017-01-04 11:15:47
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11哈哈

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by weiwokaoyan at 2017-01-03 16:57:31
蛋白洗脱所选用的缓冲液不只是和pH有关吧,你试试不同浓度梯度的缓冲溶液

恩恩,感觉浓度梯度不是主要原因,我也想过可能是浓度梯度,但是,感觉ph更主要,试完ph值,还不行的话,我就试试缓冲溶液浓度
6楼2017-01-04 11:22:08
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11哈哈

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-01-03 12:18:58
pH9.5硼酸缓冲液
我可以告诉你0、2ML硼酸缓冲液的配制方法
A液: 硼酸 1、2368g B液:硼酸钠(硼砂)1、907g
氯化钠 0、2925g 加蒸馏水 100ml
加蒸馏水到100ml
配PH9、5
取B 液10ml 既可
PH9、11取A 液1、0 ...

谢谢你
7楼2017-01-04 11:30:29
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11哈哈

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-01-03 12:18:58
pH9.5硼酸缓冲液
我可以告诉你0、2ML硼酸缓冲液的配制方法
A液: 硼酸 1、2368g B液:硼酸钠(硼砂)1、907g
氯化钠 0、2925g 加蒸馏水 100ml
加蒸馏水到100ml
配PH9、5
取B 液10ml 既可
PH9、11取A 液1、0 ...

其实,我想知道适用于阴离子交换的填料的碱性缓冲溶液,因为,有的缓冲溶液不适合
8楼2017-01-04 13:12:01
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11哈哈

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hldj1964 at 2017-01-03 12:18:58
pH9.5硼酸缓冲液
我可以告诉你0、2ML硼酸缓冲液的配制方法
A液: 硼酸 1、2368g B液:硼酸钠(硼砂)1、907g
氯化钠 0、2925g 加蒸馏水 100ml
加蒸馏水到100ml
配PH9、5
取B 液10ml 既可
PH9、11取A 液1、0 ...

其实,我想知道适用于阴离子交换填料的碱性缓冲溶液,想请有经验的大神指教一下
9楼2017-01-04 13:13:43
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

用盐洗脱,若还洗脱不下来,蛋白就变性了,就固态化了,要处理柱子。
10楼2017-01-09 16:21:53
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